產(chǎn)品名稱(chēng):人肝癌亞歷山大細(xì)胞PLC/PRF/5
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無(wú)血清凍存液（貨號(hào)：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫(kù)的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫(kù)細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無(wú)菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過(guò)渡培養(yǎng) |
人肝癌亞歷山大細(xì)胞PLC/PRF/5收到貨后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿(mǎn)完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過(guò)80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
人肝癌亞歷山大細(xì)胞PLC/PRF/5培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶(hù)收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過(guò)80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無(wú)血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請(qǐng)參考我司官網(wǎng)貨號(hào)：C7001）
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人肝癌亞歷山大細(xì)胞PLC/PRF/5部分產(chǎn)品：
YS3461 CCRFS180II 小鼠肉瘤成纖維細(xì)胞CCRFS180II
YS3462 351 小鼠雜交瘤細(xì)胞抗CD235.1
YS3463 FreestyleCHOS 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞Freestyle CHO-S
YS3464 SH2 小鼠B淋巴細(xì)胞白血病SH2
YS3465 H1Hela 人宮頸癌細(xì)胞H1 Hela
YS3466 IPECJ2 豬正常的腸上皮細(xì)胞IPEC-J2
YS3467 CHO/DHFR 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞CHO/DHFR
YS3468 MEL（MEL745AclDS19） 小鼠紅白血病細(xì)胞MEL（MEL-745A cl. DS19）
YS3469 JAWSⅡ 小鼠骨髓（未成熟）樹(shù)突狀細(xì)胞JAWSⅡ
YS3470 ZFL 斑馬魚(yú)肝臟組織細(xì)胞ZFL
YS3471 GM12882 人B淋巴細(xì)胞GM12882
YS3472 GM01176 人成纖維細(xì)胞GM01176
YS3473 GM50142 人B淋巴細(xì)胞GM50142
YS3474 GM50113 人B淋巴細(xì)胞GM50113
YS3475 GM11404 人B淋巴細(xì)胞GM11404
YS3476 GM23465 人B淋巴細(xì)胞GM23465
YS3477 GM01359 人成纖維細(xì)胞GM01359
YS3478 AG09802 人B淋巴細(xì)胞AG09802
YS3479 GM21833 人B淋巴細(xì)胞GM21833
YS3480 VK2/E6E7 人陰道粘膜上皮細(xì)胞VK2/E6E7
YS3481 GM02008 人成纖維細(xì)胞GM02008
YS3482 GM11115 人成纖維細(xì)胞GM11115
YS3483 GM13325 人成纖維細(xì)胞GM13325
YS3484 GM09326 人成纖維細(xì)胞GM09326
YS3485 GM00526 人成纖維細(xì)胞GM00526
YS3486 GM50152 人B淋巴細(xì)胞GM50152
YS3487 H197/IGFIR 褐家鼠腦海馬體成纖維細(xì)胞H19-7/IGF-IR
YS3490 EO771 小鼠髓樣乳腺癌貼壁細(xì)胞EO771
YS3491 GM03606 唐氏綜合癥背景羊水來(lái)源細(xì)胞GM03606
YS3492 BB71 小鼠（骨髓瘤）雜交瘤細(xì)胞BB7.1
YS3493 BBM1 小鼠（骨髓瘤）雜交瘤細(xì)胞BBM.1
YS3494 L243 小鼠（骨髓瘤）雜交瘤細(xì)胞L243
YS3495 4.00E+11 小鼠（骨髓瘤）雜交瘤細(xì)胞4E11
YS3496 BB77 小鼠（骨髓瘤）雜交瘤細(xì)胞BB7.7
YS3497 IGG6A6 小鼠（骨髓瘤）雜交瘤細(xì)胞IGG-6A6
YS3498 93F10 小鼠（骨髓瘤）雜交瘤細(xì)胞9.3F10
YS3499 NEGFP4C 小鼠神經(jīng)干細(xì)胞NE-GFP-4C
YS3500 GM00325 人成纖維細(xì)胞GM00325
更多細(xì)胞請(qǐng)咨詢(xún)我們：人肝癌亞歷山大細(xì)胞PLC/PRF/5
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上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類(lèi)試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過(guò)公司各部門(mén)員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶(hù)厚愛(ài)，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神，堅(jiān)持以?xún)?yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國(guó)內(nèi)外廣大用戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí)，也建立了一套集技術(shù)支持，物流售后服務(wù)等多部門(mén)聯(lián)動(dòng)服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個(gè)客戶(hù)，雅吉生物的試劑盒，在國(guó)內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用，深受廣大科研人員好評(píng)，先后在權(quán)威雜志文章中被引用。
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