產(chǎn)品名稱：大鼠心肌微血管內(nèi)皮細胞CMECs
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細胞描述 | 本庫的細胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
大鼠心肌微血管內(nèi)皮細胞CMECs收到后處理
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)霓k法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
大鼠心肌微血管內(nèi)皮細胞CMECs培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴格無菌操作；將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
三、細胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號：C7001）
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細胞，并放置于凍存管中；
4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
大鼠心肌微血管內(nèi)皮細胞CMECs部分相關(guān)細胞如下：
YS2636 CMECs 大鼠心肌微血管內(nèi)皮細胞CMECs
YS2637 LA4 鼠肺癌細胞LA4
YS2638 RAMSCs 大鼠脂肪間充質(zhì)干細胞RAMSCs
YS2639 W256 Walker氏癌肉瘤256瘤株W256
YS2640 293C18293E 人胚腎細胞293C18293E
YS2641 ABE-812 小鼠前B淋巴母細胞瘤細胞ABE-8.12
YS2642 HP615 小鼠肺癌細胞HP615
YS2643 BEND 牛子宮內(nèi)膜上皮細胞BEND
YS2644 H4IIE 大鼠肝癌細胞H4IIE
YS2645 L6TG 大鼠肌母細胞L6TG
YS2646 AMCHN8 人喉癌細胞AMCHN8
YS2647 HUSMC 人子宮平滑肌細胞HUSMC
YS2648 IOSE29 人卵巢上皮細胞IOSE29
YS2649 HemECs 人血管瘤內(nèi)皮細胞HemECs
YS2650 NHEK 正常人表皮角質(zhì)形成細胞NHEK
YS2651 HPMEC 人肺微血管內(nèi)皮細胞HPMEC
YS2652 BAEC 牛主動脈內(nèi)皮細胞BAEC
YS2653 HConEpic 人結(jié)膜上皮細胞HConEpic
YS2654 HD11 雞巨噬細胞HD11
YS2655 RASMC 大鼠主動脈平滑肌細胞RASMC
YS2656 KTA7 人肺腺癌細胞KTA7
YS2657 alphaTC1clone6 鼠胰島素瘤胰島a細胞alphaTC1clone6
YS2658 RAOEC 大鼠血管內(nèi)皮細胞RAOEC
YS2659 Walker256 大鼠腹水癌細胞Walker256
YS2660 HPDLF 人牙周膜成纖維細胞HPDLF
YS2661 CPAE 牛肺血管內(nèi)皮細胞CPAE
YS2662 CPA47 牛肺血管內(nèi)皮細胞CPA47
YS2663 NEC8 人畸胎瘤細胞NEC8
YS2664 HSAS3 人皮膚成纖維細胞HSAS3
YS2665 MMVECs 小鼠心肌微血管內(nèi)皮細胞MMVECs
YS2666 OV2008 人卵巢癌細胞OV2008
YS2667 JKT1 人精原瘤細胞JKT1
YS2668 JG 小鼠腎小球旁細胞JG
YS2669 95C 人肺巨細胞癌細胞(低轉(zhuǎn)移)95C
YS2670 697 人前B細胞白血病細胞697
YS2671 ML2 人急性髓單核細胞白血病細胞ML2
YS2672 WiDr 人結(jié)直腸癌細胞WiDr
YS2673 MCF12A 人乳腺癌細胞MCF12A
YS2674 EVSAT 人乳腺癌細胞EVSAT
YS2675 MDAMB435 人乳腺癌細胞MDAMB435
YS2676 SW1417 人結(jié)腸癌細胞SW1417
YS2677 KBM7 人慢性髓白血病細胞KBM7
YS2678 SUM149PT 人乳腺癌細胞SUM149PT
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上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學、免疫學、微生物學、細胞學等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風生物”、“彩佑實業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽”的精神，堅持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽為國內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時，也建立了一套集技術(shù)支持，物流售后服務(wù)等多部門聯(lián)動服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個客戶，雅吉生物的試劑盒，在國內(nèi)眾多重點實驗室廣泛使用，深受廣大科研人員好評，先后在權(quán)威雜志文章中被引用。
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