產(chǎn)品名稱：大鼠腎細(xì)胞正常NRK49F
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無(wú)血清凍存液（貨號(hào)：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫(kù)的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫(kù)細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無(wú)菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過(guò)渡培養(yǎng) |
大鼠腎細(xì)胞正常NRK49F到貨后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過(guò)80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
大鼠腎細(xì)胞正常NRK49F培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過(guò)80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無(wú)血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請(qǐng)參考我司官網(wǎng)貨號(hào)：C7001）
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
大鼠腎細(xì)胞正常NRK49F部分相關(guān)細(xì)胞如下：
YS1904 LB31ATCCHB298 小鼠雜交瘤細(xì)胞LB3.1ATCCHB298
YS1905 MOVAS1 小鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞MOVAS1
YS1906 TC1crl2493 小鼠淋巴母細(xì)胞b淋巴細(xì)胞TC1crl2493
YS1907 RAW2647SEAP/LUC 小鼠白血病細(xì)胞RAW264.7SEAP/LUC
YS1908 NSC34 小鼠神經(jīng)元細(xì)胞NSC34
YS1909 CTLA4Ig24 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞CTLA4Ig24
YS1910 Lec1 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞Lec1
YS1911 OK 負(fù)鼠腎上皮細(xì)胞OK
YS1912 AB22 小鼠胚胎干細(xì)胞AB2.2
YS1913 2666 小鼠胰腺腺泡癌細(xì)胞2666
YS1914 C1498 小鼠急性骨髓性白血病C1498
YS1915 B16F10OVA(OPT) 小鼠黑色素瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記-OVA雞基因修飾B16F10OVA(OPT)
YS1916 SCC7 小鼠頭頸鱗癌細(xì)胞SCC7
YS1917 GT11 小鼠垂體瘤細(xì)胞GT11
YS1918 GT17 小鼠垂體瘤細(xì)胞GT17
YS1919 DC24 小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞DC2.4
YS1920 MN9D 小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞MN9D
YS1921 CHOK1 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞CHOK1
YS1922 HEIOC1 小鼠耳蝸毛細(xì)胞HEIOC1
YS1923 CTLL2 小鼠T淋巴細(xì)胞CTLL2
YS1924 E0771 小鼠髓樣乳腺癌細(xì)胞E0771
YS1925 moc1 小鼠口腔鱗狀細(xì)胞moc1
YS1926 moc2 小鼠口腔鱗狀細(xì)胞moc2
YS1927 min6 小鼠胰島β細(xì)胞min6
YS1928 LA795 小鼠肺癌細(xì)胞-腺癌LA795
YS1929 hep534 小鼠肝癌細(xì)胞hep53.4
YS1930 CMT6461 小鼠肺腺癌細(xì)胞CMT6461
YS1931 MELorMEL745AclDS19 小鼠紅白血病細(xì)胞MELorMEL745Acl.DS19
YS1932 JAWS2 小鼠骨髓未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞JAWS2
YS1933 MCA205 小鼠纖維肉瘤細(xì)胞MCA205
YS1934 NIH3T3/RFP 小鼠胚胎細(xì)胞NIH3T3/RFP
YS1935 YUMM17 小鼠黑色素瘤細(xì)胞YUMM1.7
YS1936 MC38OVA 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞-OVA雞基因修飾MC38OVA
YS1937 15P1 小鼠睪丸上皮細(xì)胞15P1
YS1938 AtT20 小鼠垂體瘤細(xì)胞AtT20
YS1939 cmt93 小鼠結(jié)直腸癌細(xì)胞cmt93
YS1940 L6565 小鼠白血病細(xì)胞L6565
YS1941 Y1[Y1] 小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞Y1[Y1]
YS1942 CFSC8B 大鼠永生型肝星狀細(xì)胞CFSC8B
YS1943 AR42J 大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細(xì)胞AR42J
YS1944 INS1 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞INS1
YS1945 RSC96 大鼠雪旺細(xì)胞RSC96
YS1946 A7r5 大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞A7r5
更多細(xì)胞請(qǐng)咨詢我們：大鼠腎細(xì)胞正常NRK49F
關(guān)鍵字： 大鼠腎細(xì)胞正常NRK49F;大鼠腎細(xì)胞正常;NRK49F;ATCC代購(gòu);ATCC引種;
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過(guò)公司各部門(mén)員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛(ài)，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神，堅(jiān)持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國(guó)內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí)，也建立了一套集技術(shù)支持，物流售后服務(wù)等多部門(mén)聯(lián)動(dòng)服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個(gè)客戶，雅吉生物的試劑盒，在國(guó)內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用，深受廣大科研人員好評(píng)，先后在權(quán)威雜志文章中被引用。
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