產品名稱：小鼠胚胎成纖維細胞BALB3T3cloneA31
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細胞描述 | 本庫的細胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細胞轉讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
小鼠胚胎成纖維細胞BALB3T3cloneA31到后處理
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)霓k法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
小鼠胚胎成纖維細胞BALB3T3cloneA31培養(yǎng)步驟
一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
三、細胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號：C7001）
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細胞，并放置于凍存管中；
4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
小鼠胚胎成纖維細胞BALB3T3cloneA31部分相關細胞如下：
YS1795 OKT11 小鼠雜交瘤（抗CD2）細胞OKT11
YS1796 SDOW17 小鼠雜交瘤SDOW17
YS1797 PT67 小鼠源基于MLV-10A1逆轉錄病毒包裝細胞系PT67
YS1798 BAF3 小鼠原B細胞株BAF3
YS1799 PAN02/LUC 小鼠胰腺癌細胞/胰腺導管癌+LUCPAN02/LUC
YS1800 PAN02 小鼠胰腺癌細胞/胰腺導管癌PAN02
YS1801 LTPA 小鼠胰腺癌細胞LTPA
YS1802 BetaTC6 小鼠胰島素瘤胰島Beta細胞BetaTC6
YS1803 MS1 小鼠胰島內皮細胞MS1
YS1804 HL1 小鼠心肌細胞HL1
YS1805 BV2 小鼠小膠質細胞BV2
YS1806 STC1 小鼠小腸內分泌細胞STC1
YS1807 RGC5 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞RGC5
YS1808 MPC5 小鼠腎足細胞MPC5
YS1809 IMCD3 小鼠腎臟內髓集合管3上皮細胞IMCD3
YS1810 SV40MES13 小鼠腎小球系膜細胞SV40MES13
YS1811 Renca 小鼠腎癌細胞Renca
YS1812 C172 小鼠神經(jīng)干細胞C17.2
YS1813 HC11 小鼠乳腺上皮細胞HC11
YS1814 HC11MAMMARY 小鼠乳腺上皮細胞HC11MAMMARY
YS1815 4T1/LUC 小鼠乳腺癌細胞+LUC4T1/LUC
YS1816 4T1 小鼠乳腺癌細胞4T1
YS1817 EMT6 小鼠乳腺癌細胞EMT6
YS1818 MA891 小鼠乳腺癌高轉移細胞MA891
YS1819 MFC 小鼠前胃癌細胞MFC
YS1820 RM1 小鼠前列腺癌細胞RM1
YS1821 ASMC 小鼠氣道平滑肌細胞ASMC
YS1822 Lwnt3a 小鼠皮下結締組織細胞Lwnt3a
YS1823 NIH3T3 小鼠胚胎細胞NIH3T3
YS1824 ATDC5 小鼠胚胎瘤細胞-軟骨細胞ATDC5
YS1825 E14 小鼠胚胎干細胞E14
YS1826 3T3L1 小鼠胚胎成纖維細胞3T3L1
YS1827 BALB3T3cloneA31 小鼠胚胎成纖維細胞BALB3T3cloneA31
YS1828 C3H10T12,Clone8 小鼠胚胎成纖維細胞C3H10T12,Clone8
YS1829 MEF 小鼠胚胎成纖維細胞MEF
更多細胞請咨詢我們：小鼠胚胎成纖維細胞BALB3T3cloneA31
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