產(chǎn)品名稱：小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞Lwnt3a
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞Lwnt3a到后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞Lwnt3a培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號：C7001）
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞Lwnt3a部分相關(guān)細(xì)胞如下：
YS1795 OKT11 小鼠雜交瘤（抗CD2）細(xì)胞OKT11
YS1796 SDOW17 小鼠雜交瘤SDOW17
YS1797 PT67 小鼠源基于MLV-10A1逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系PT67
YS1798 BAF3 小鼠原B細(xì)胞株BAF3
YS1799 PAN02/LUC 小鼠胰腺癌細(xì)胞/胰腺導(dǎo)管癌+LUCPAN02/LUC
YS1800 PAN02 小鼠胰腺癌細(xì)胞/胰腺導(dǎo)管癌PAN02
YS1801 LTPA 小鼠胰腺癌細(xì)胞LTPA
YS1802 BetaTC6 小鼠胰島素瘤胰島Beta細(xì)胞BetaTC6
YS1803 MS1 小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞MS1
YS1804 HL1 小鼠心肌細(xì)胞HL1
YS1805 BV2 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞BV2
YS1806 STC1 小鼠小腸內(nèi)分泌細(xì)胞STC1
YS1807 RGC5 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞RGC5
YS1808 MPC5 小鼠腎足細(xì)胞MPC5
YS1809 IMCD3 小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細(xì)胞IMCD3
YS1810 SV40MES13 小鼠腎小球系膜細(xì)胞SV40MES13
YS1811 Renca 小鼠腎癌細(xì)胞Renca
YS1812 C172 小鼠神經(jīng)干細(xì)胞C17.2
YS1813 HC11 小鼠乳腺上皮細(xì)胞HC11
YS1814 HC11MAMMARY 小鼠乳腺上皮細(xì)胞HC11MAMMARY
YS1815 4T1/LUC 小鼠乳腺癌細(xì)胞+LUC4T1/LUC
YS1816 4T1 小鼠乳腺癌細(xì)胞4T1
YS1817 EMT6 小鼠乳腺癌細(xì)胞EMT6
YS1818 MA891 小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞MA891
YS1819 MFC 小鼠前胃癌細(xì)胞MFC
YS1820 RM1 小鼠前列腺癌細(xì)胞RM1
YS1821 ASMC 小鼠氣道平滑肌細(xì)胞ASMC
YS1822 Lwnt3a 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞Lwnt3a
YS1823 NIH3T3 小鼠胚胎細(xì)胞NIH3T3
YS1824 ATDC5 小鼠胚胎瘤細(xì)胞-軟骨細(xì)胞ATDC5
YS1825 E14 小鼠胚胎干細(xì)胞E14
YS1826 3T3L1 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞3T3L1
YS1827 BALB3T3cloneA31 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞BALB3T3cloneA31
YS1828 C3H10T12,Clone8 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞C3H10T12,Clone8
YS1829 MEF 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞MEF
更多細(xì)胞請咨詢我們：小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞Lwnt3a
關(guān)鍵字： 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞Lwnt3a;小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞;Lwnt3a;ATCC引種;ATCC代購;
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神，堅(jiān)持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
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