產(chǎn)品名稱：人腎細胞癌CAL54
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細胞描述 | 本庫的細胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
人腎細胞癌CAL54到貨后處理
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)霓k法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
人腎細胞癌CAL54培養(yǎng)步驟
一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴格無菌操作；將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
三、細胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號：C7001）
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細胞，并放置于凍存管中；
4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人腎細胞癌CAL54部分相關細胞如下：
YS1627 UPCI:SCC131 人舌頭鱗癌細胞UPCI:SCC131
YS1628 SC1 人B細胞淋巴瘤細胞SC1
YS1629 CMK 人原始巨核細胞白血病細胞CMK
YS1630 U2940 人B細胞淋巴瘤U2940
YS1631 WILL2 人B細胞淋巴瘤WILL2
YS1632 /Fu97 人胃癌細胞/Fu97
YS1633 Hs766T 人胰腺癌細胞Hs766T
YS1634 RKOE6 人結腸癌細胞系RKOE6
YS1635 SW837 人結直腸腺癌上皮細胞SW837
YS1636 RKOAS451 人結腸癌細胞RKOAS451
YS1637 RMGI 人卵巢癌細胞RMGI
YS1638 MOLP8 人多發(fā)性骨髓瘤MOLP8
YS1639 JJN3 人白血病細胞JJN3
YS1640 CL11 人結腸癌細胞CL11
YS1641 CL40 人結腸癌細胞CL40
YS1642 NCIH1755 人肺癌細胞NCIH1755
YS1643 MNNGHOSCl 人骨肉瘤細胞MNNGHOSCl
YS1644 NCIH727 人肺支氣管良性腫瘤NCIH727
YS1645 HSC2 人口腔鱗狀腫瘤細胞HSC2
YS1646 KMS11 人骨髓瘤細胞KMS11
YS1647 WILL1 人B細胞淋巴瘤WILL1
YS1648 HARAB 人肺腺癌細胞HARAB
YS1649 SKCO1 人結直腸腺癌細胞SKCO1
YS1650 HDQP1 人乳腺導管癌細胞HDQP1
YS1651 COLO824 人乳腺癌細胞COLO824
YS1652 HCC1428 人乳腺癌細胞HCC1428
YS1653 CAL148 人乳腺癌細胞CAL148
YS1654 RCK8 人B細胞淋巴瘤RCK8
YS1655 NCIBL2009 人淋巴母細胞瘤(EBV轉(zhuǎn)化)NCIBL2009
YS1656 LCLC97TM1 人大細胞肺癌LCLC97TM1
YS1657 EBC1 人肺腺癌細胞EBC1
YS1658 NCIH1373 人肺腺癌細胞stage3ANCIH1373
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上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學領域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術服務的生物企業(yè)。包括分子生物學、免疫學、微生物學、細胞學等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風生物”、“彩佑實業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務、信譽”的精神，堅持以優(yōu)良的技術、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽為國內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務。
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