中文名:過氧化氫酶活性檢測試劑盒(紫外吸收法)
英文名:Catalase Assay Kit(UV absorption method)
純度:100T/96S
貨號:C661945
包裝:1kit
存儲溫度:2-8°C儲存,避光
產品介紹:
檢測原理CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,是最主要的 H?O?清除酶,在活性氧清除系統(tǒng)中具有重要作用。H?O? 在 240nm 下有特征吸收峰,CAT 能夠分解 H?O?,使反應溶液 240nm 下的吸光度隨反應時間而下降,根據吸光度的變化率可計算出 CAT 活性。試劑盒組分:
需要而未提供的試劑和器材紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔(UV 板)、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水樣本處理1、細菌或細胞樣品:收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照每 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率 20%,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。2、組織樣品:稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。3、血清(漿)樣品:直接檢測。操作步驟※正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定。1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上,調節(jié)波長至 240nm,蒸餾水調零。2、測定前將 CAT 檢測工作液在 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)水浴 10min 以上。3、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 樣本和 190μL 工作液,立即混勻并計時,記錄 240nm 下初始吸光值 A1 和1min 后的吸光值 A2。計算ΔA=A1-A2。?
活性計算
注意事項 如果反應液有大量氣泡產生,將樣本用蒸餾水稀釋后再進行測定。
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