中文名:RNase抑制劑(RNasin)
英文名:RNase Inhibitor(RNasin)
純度:40U/μl
貨號:R292575
包裝:1ml
存儲溫度:-20°C儲存
產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品說明
本制品是經(jīng)過大腸桿菌表達的重組蛋白,與RNase A形成 1:1 復合體,對RNase表現(xiàn)高度的非競爭性抑制,本品屬蛋白質(zhì)性質(zhì),與其它競爭性抑制劑(核酸類、無機磷酸類)不同,可以很容易地通過苯酚處理將其從反應體系中除去。
產(chǎn)品內(nèi)容
RNase Inhibitor(RNasin)(40U/μl)
純度
1)300U的RNasin和1μg的λDNA-Hind III分解物在37℃下反應1小時,DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
2)300U的RNasin和 1μg的Closed circμlar(RFI)pBR322 DNA 在37℃下反應1小時,DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
3)100U的RNasin和 1μg的16S,23S rRNA在37℃下反應1小時,RNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
4)SDS-PAGE:在分子量64KDa處是單一帶。
應用
1)cDNA 合成反應;
2)多核糖體的分離(Polysome isolation);
3)體外翻譯(In vitro translation);
4)SP6 或 T7 RNA 聚合酶的體外轉(zhuǎn)錄
5)體外無細胞系統(tǒng)轉(zhuǎn)錄(In vitro transcription with cell-free extract)。
使用注意
1)抑制活性的 pH 值范圍較廣,在 pH7~8 時表現(xiàn)最大活性;
2)起泡或強烈攪拌(Vortex 等)會引起失活;
3)不抑制 RNase H 活性。
使用例
cDNA 第一條鏈的合成。
在微量離心管中配制下列反應液,全量為20μl
試劑 | 使用量 | 終濃度 |
Total RNA or Poly(A)RNA | 1-5μg | — |
5×MMLV RT Buffer | 4μl | 1× |
dNTP Mixture(25mM ) | 0.4μl | 0.5mM |
Oligo dT or Random Primer (20μM) | 1μl | 1μM |
RNasin(40U/μl) | 1μl | 2U/μl |
MMLV Reverse Transcriptase(200U/μl) | 1μl | — |
超純水 | Up to 20μl | — |
總體積 | 20μl | — |
1)?輕攪拌。
3)?室溫下10min放置后,移入42℃溫槽中。
4)?42℃保溫1小時。
4)?把樣品移入冰中冷卻2min。
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關鍵字: RNase抑制劑(RNasin);RNase Inhibitor(RNasin)
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