產(chǎn)品名稱(chēng)：人乳腺癌細(xì)胞（非三陰）SKBR3/LUC
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無(wú)血清凍存液（貨號(hào)：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫(kù)的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫(kù)細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無(wú)菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過(guò)渡培養(yǎng) |
人乳腺癌細(xì)胞（非三陰）SKBR3/LUC收到后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿(mǎn)完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過(guò)80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話(huà)，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
人乳腺癌細(xì)胞（非三陰）SKBR3/LUC培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶(hù)收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過(guò)80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無(wú)血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請(qǐng)參考我司官網(wǎng)貨號(hào)：C7001）
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人乳腺癌細(xì)胞（非三陰）SKBR3/LUC部分相關(guān)細(xì)胞如下：
YS1257 NCIN87 人胃腺癌細(xì)胞NCIN87
YS1258 NCIN87/LUC 人胃腺癌細(xì)胞NCIN87/LUC
YS1259 ncm460 人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞ncm460
YS1260 NK92 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞NK92
YS1261 NK92MI 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞NK92MI
YS1262 NOZ 人膽囊癌細(xì)胞NOZ
YS1263 NP69 人鼻咽黏膜上皮細(xì)胞NP69
YS1264 NPCHK1 人鼻咽癌細(xì)胞系NPCHK1
YS1265 Nthyori31 人甲狀腺正常細(xì)胞Nthyori31
YS1266 OCM1A 人眼膜絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞OCM1A
YS1267 ONS76 人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞ONS76
YS1268 OSRC2 人腎癌細(xì)胞OSRC2
YS1269 OVCAR3 人卵巢腺癌細(xì)胞OVCAR3
YS1270 P53R 人結(jié)直腸癌細(xì)胞P53R
YS1271 Panc0327 人胰腺癌細(xì)胞Panc03.27
YS1272 Panc0504 人胰腺癌上皮細(xì)胞Panc05.04
YS1273 Panc1005 人胰腺癌細(xì)胞Panc10.05
YS1274 PANC1 人胰腺癌細(xì)胞PANC1
YS1275 PATU8988t 人胰腺癌細(xì)胞PATU8988t
YS1276 PATU8988S 人胰腺癌細(xì)胞PATU8988S
YS1277 PC3 人前列腺癌PC3
YS1278 pc9 人肺腺癌細(xì)胞pc9
YS1279 PC9gr 人肺癌細(xì)胞耐吉非替尼PC9/GR
YS1280 PL45 人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞PL45
YS1281 PLCPRF5 人肝癌細(xì)胞PLCPRF5
YS1282 QSG770 人正常肝細(xì)胞QSG770
YS1283 Raji 人淋巴瘤細(xì)胞Raji
YS1284 RAMOSRA1 人B淋巴瘤細(xì)胞RAMOSRA1
YS1285 RBE 人肝膽管癌細(xì)胞RBE
YS1286 RD 人胚胎性橫紋肌肉瘤細(xì)胞RD
YS1287 REH 人急性非B非T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞REH
YS1288 RKO 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞RKO
YS1289 RL952 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞RL952
YS1290 RPMI8226 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞RPMI8226
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關(guān)鍵字： 人乳腺癌細(xì)胞（非三陰）SKBR3/LUC;人乳腺癌細(xì)胞（非三陰）;SKBR3/LUC;ATCC細(xì)胞;雅吉細(xì)胞庫(kù);
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