產品名稱:人宮頸上皮/陰道上皮Ect1E6E7BSL1
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 人腦髓母細胞瘤細胞DAOY 無血清凍存液(貨號:C7001) |
細胞描述 | 本庫的細胞僅用于科研工作,未經許可不得用于其他目的,使用者不得將本庫細胞轉讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基,留作過渡培養(yǎng) |
人宮頸上皮/陰道上皮Ect1E6E7BSL1處理
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作,培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,加入6ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。(注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基)
人宮頸上皮/陰道上皮Ect1E6E7BSL1培養(yǎng)步驟
一、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,完全脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內,嚴格無菌操作;將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。
三、細胞凍存:(注:無血清凍存液凍存細胞的方法請參考我司官網貨號:C7001)
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、用適量的凍存液重懸細胞,并放置于凍存管中;
4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃
人宮頸上皮/陰道上皮Ect1E6E7BSL1部分相關細胞如下:
YS1067 Detroit562 人口腔咽頭癌胸水轉移細胞Detroit562
YS1068 DLD1 人結直腸腺癌細胞DLD1
YS1069 DMS53 人小細胞肺癌細胞DMS53
YS1070 DU145 人前列腺癌細胞DU145
YS1071 EAhy926 人臍靜脈細胞融合細胞EA.hy926
YS1072 Eca109 人食管癌細胞Eca109
YS1073 Ect1E6E7BSL1 人宮頸上皮/陰道上皮Ect1E6E7BSL1
YS1074 ECV304 人膀胱癌細胞人臍靜脈內皮ECV304
YS1075 ECV304/RFP 人膀胱癌細胞+RFP人臍靜脈內皮ECV304/RFP
YS1076 EJ1T24 人膀胱癌細胞EJ1T24
YS1077 ES2 人卵巢透明細胞癌細胞ES2
YS1078 F56 小鼠腺癌細胞系F56
YS1079 FADu 人舌咽鱗癌細胞FADu
YS1080 GBCSD 人膽囊癌細胞GBCSD
YS1081 GBCSD/LUC 人膽囊癌細胞GBCSD/LUC
YS1082 GES1 人胃黏膜上皮細胞GES1
YS1083 GSHEPG2 人肝癌細胞亞型(過表達谷氨酰氨合成酶)GSHEPG2
YS1084 h1 人胚胎干細胞H1h1
YS1085 h9 人胚胎干細胞H9h9
YS1086 H9HTLVIIIB 人T淋巴瘤白血病細胞H9HTLVIIIB
YS1087 hacat 人表皮細胞/角質形成細胞hacat
YS1088 hacat/LUC 人表皮細胞/角質形成細胞+LUChacat/LUC
YS1089 HBE135E6E7 人支氣管上皮細胞HBE135E6E7
YS1090 HBL100 人整合SV40基因的乳腺上皮細胞HBL100
YS1091 HBVP 人腦血管周細胞(原代)HBVP
YS1092 HCC38 人乳腺導管癌細胞(三陰性)HCC38
YS1093 hcc1937 人乳腺癌細胞(三陰性)hcc1937
YS1094 HCC827 人非小細胞肺癌細胞HCC827
YS1095 HCC827/LUC 人非小細胞肺癌細胞HCC827/LUC
YS1096 HCC94 人子宮鱗癌細胞(高分化)HCC94
YS1097 hccc9810 人膽管細胞型肝癌細胞hccc9810
YS1098 HCCLM3MHCC97 人高轉移肝癌細胞HCCLM3MHCC97
YS1099 HCMECD3 人腦微血管內皮細胞HCMECD3
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上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科學領域,提供科研類試劑、耗材、儀器、技術服務的生物企業(yè)。包括分子生物學、免疫學、微生物學、細胞學等 。旗下擁有 “雅吉生物”、“晶風生物”、“彩佑實業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內擁有較高知名度,深得新老客戶厚愛,本著“優(yōu)質、服務、信譽”的精神,堅持以優(yōu)良的技術、優(yōu)質的產品、良好的信譽為國內外廣大用戶提供優(yōu)質生物產品和服務。
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