產(chǎn)品名稱：人彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞DB
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞DAOY 無(wú)血清凍存液（貨號(hào)：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫(kù)的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫(kù)細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無(wú)菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過(guò)渡培養(yǎng) |
人彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞DB處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過(guò)80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
人彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞DB培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過(guò)80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無(wú)血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請(qǐng)參考我司官網(wǎng)貨號(hào)：C7001）
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞DB部分相關(guān)細(xì)胞如下：
YS1041 CAKI2 人腎透明細(xì)胞癌CAKI2
YS1042 CAL27 人舌鱗癌細(xì)胞CAL27
YS1043 Calu1 人肺癌細(xì)胞/鱗癌Calu1
YS1044 Calu3 人肺腺癌細(xì)胞Calu3
YS1045 calu6 人間變性肺腺癌細(xì)胞calu6
YS1046 CAOV3 人卵巢腺癌細(xì)胞CAOV3
YS1047 Capan1 人胰腺癌細(xì)胞Capan1
YS1048 Capan2 人胰腺癌細(xì)胞Capan2
YS1049 CaSKi 人宮頸癌細(xì)胞CaSKi
YS1050 CCD841CON 人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞CCD841CON
YS1051 CCRFCEM 人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞CCRFCEM
YS1052 CEMC1 人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞CEMC1
YS1053 changliver 人宮頸癌細(xì)胞changliver
YS1054 CoC1 人卵巢癌細(xì)胞CoC1
YS1055 COLO205 人結(jié)腸癌細(xì)胞COLO205
YS1056 COLO320 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞COLO320
YS1057 COLO320DM 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞COLO320DM
YS1058 COLO320HSR 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞COLO320HSR
YS1059 CW2 人結(jié)腸癌細(xì)胞CW2
YS1060 CX1 人結(jié)腸癌細(xì)胞CX1
YS1061 D283Med 人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞D283Med
YS1062 D341Med 人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞D341Med
YS1063 DAMI 人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞DAMI
YS1064 DAOY 人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞DAOY
YS1065 DAUDI 人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞DAUDI
YS1066 DB 人彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞DB
YS1067 Detroit562 人口腔咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細(xì)胞Detroit562
YS1068 DLD1 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞DLD1
YS1069 DMS53 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞DMS53
YS1070 DU145 人前列腺癌細(xì)胞DU145
YS1071 EAhy926 人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞EA.hy926
YS1072 Eca109 人食管癌細(xì)胞Eca109
YS1073 Ect1E6E7BSL1 人宮頸上皮/陰道上皮Ect1E6E7BSL1
YS1074 ECV304 人膀胱癌細(xì)胞人臍靜脈內(nèi)皮ECV304
YS1075 ECV304/RFP 人膀胱癌細(xì)胞+RFP人臍靜脈內(nèi)皮ECV304/RFP
YS1076 EJ1T24 人膀胱癌細(xì)胞EJ1T24
YS1077 ES2 人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞ES2
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關(guān)鍵字： 人彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞DB;人彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;DB;ATCC細(xì)胞;雅吉細(xì)胞庫(kù);
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過(guò)公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛(ài)，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神，堅(jiān)持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國(guó)內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí)，也建立了一套集技術(shù)支持，物流售后服務(wù)等多部門聯(lián)動(dòng)服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個(gè)客戶，雅吉生物的試劑盒，在國(guó)內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用，深受廣大科研人員好評(píng)，先后在權(quán)威雜志文章中被引用。
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