產(chǎn)品名稱：人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞CAKI1

人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞CAKI1收到后處理

細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）

人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞CAKI1培養(yǎng)步驟

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。

三、細(xì)胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號(hào)：C7001）

1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；

4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃

人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞CAKI1部分相關(guān)細(xì)胞如下：

YS1001 A172 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞A172

YS1002 A204 人胚胎橫紋肌肉瘤細(xì)胞A204

YS1003 A2058 人類轉(zhuǎn)移性黑色素瘤A2058

YS1004 A2780 人卵巢癌細(xì)胞A2780

YS1005 A2780/GFP 人卵巢癌細(xì)胞A2780/GFP

YS1006 A3 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞A3

YS1007 A375 人惡性黑色素瘤細(xì)胞A375

YS1008 A375E/GFP 人惡性黑色素瘤細(xì)胞A375E/GFP

YS1009 A431 人表皮癌細(xì)胞/鱗癌A431

YS1010 A498 人腎癌細(xì)胞A498

YS1011 A549 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549

YS1012 A549/GFP/LUC 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549/GFP/LUC

YS1013 A549/LUC 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549/LUC

YS1014 A549/RFP 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549/RFP

YS1015 A673 人骨尤文肉瘤細(xì)胞A673

YS1016 A875 人黑色素瘤細(xì)胞A875

YS1017 AC16 人心肌細(xì)胞AC16

YS1018 ACHN 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞ACHN

YS1019 AGS 人胃腺癌細(xì)胞AGS

YS1020 AN3CA 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞AN3CA

YS1021 ARPE19 人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞ARPE19

YS1022 AsPC1 人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞AsPC1

YS1023 AsPC1GEM 人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞耐吉西他濱AsPC1GEM

YS1024 AV3 人宮頸癌細(xì)胞AV3

YS1025 ball1 人B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病ball1

YS1026 BCPaP 人甲狀腺癌細(xì)胞BCPaP

YS1027 beas2b 人肺支氣管上皮（間皮）細(xì)胞beas2b

YS1028 Bel7402 人肝癌細(xì)胞Bel7402

YS1029 Bel7405 人肝癌細(xì)胞Bel7405

YS1030 BGC823 人胃癌細(xì)胞BGC823

YS1031 BIU87 人膀胱癌細(xì)胞BIU87

YS1032 BJ 人包皮成纖維細(xì)胞（有限細(xì)胞系）BJ

YS1033 BT474 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞（非三陰）BT474

YS1034 BT549 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞（三陰性）BT549

YS1035 BTB 人膀胱癌細(xì)胞BTB

YS1036 BxPC3 人原位胰腺腺癌細(xì)胞BxPC3

YS1037 C33A 人宮頸癌細(xì)胞C33A

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