BCA(bicinchoninic acid)法蛋白濃度定量試劑盒是在世界上常用的蛋白濃度檢測方法之一BCA法基礎(chǔ)上改進(jìn)而成。眾所周知,二價(jià)銅離子在堿性的條件下,可以被蛋白質(zhì)還原成一價(jià)銅離子(biuret reaction),一價(jià)銅離子和獨(dú)特的BCA Solution A(含有BCA)相互作用產(chǎn)生敏感的顏色反應(yīng)。兩分子的BCA螯合一個(gè)銅離子,形成紫色的反應(yīng)復(fù)合物。該水溶性的復(fù)合物在562nm處顯示強(qiáng)烈的吸光性,吸光度和蛋白濃度在廣泛范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系,因此根據(jù)吸光值可以推算出蛋白濃度。
質(zhì)量不好的BCA配成溶液后加入二價(jià)銅離子后會出現(xiàn)紫色,深藍(lán)色等顏色導(dǎo)致影響蛋白含量測定。
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