中文名:5-異硫氰酸熒光素 (異構(gòu)體I)
英文名:5-FITC(isomer I)
中文別名:熒光素-5-異氰酸酯 (異構(gòu)體I)|異硫氰酸熒光素 (異構(gòu)體I)|5-異硫氰酸熒光素 (異構(gòu)體I)|5-FITC (異構(gòu)體I)
英文別名:3326-32-7|FITC|Fluorescein isothiocyanate isomer I|5-FITC|FLUORESCEIN-5-ISOTHIOCYANATE|5-isothiocyanatofluorescein|fluorescein 5-isothiocyanate|3',6'-dihydroxy-5-isothiocyanato-3H-spiro[isobenzofuran-1,9'-xanthen]-3-one|FITC isomer 1|MFCD00005063|3012-71-
純度:≥95% (HPLC)
貨號(hào):F272903
包裝:100mg、250mg
Cas號(hào):3326-32-7
存儲(chǔ)溫度:避光,-20°C儲(chǔ)存,充氬,干燥
產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
外觀:黃色粉末
純度:≥95% (HPLC)
產(chǎn)品參數(shù)
Ex(nm):494
Em(nm):520
Solvent:DMSO
產(chǎn)品描述
FITC能和各種抗體蛋白結(jié)合,結(jié)合后的抗體不喪失與一定抗原結(jié)合的特異性,并在堿性溶液中具有強(qiáng)烈的黃綠色熒光。通過在熒光顯微鏡下觀察或流式細(xì)胞儀分析可對(duì)相應(yīng)抗原進(jìn)行定性、定位或定量的檢測(cè)。用于醫(yī)學(xué),農(nóng)學(xué)和畜牧等方面,可對(duì)由地細(xì)菌病毒和寄生蟲等所致疾病進(jìn)行快速診斷。
FITC標(biāo)記抗體流程
(1)將待交聯(lián)的蛋白(濃度≥1mg/mL)對(duì)交聯(lián)反應(yīng)液透析三次4℃,至pH=9.0。交聯(lián)反應(yīng)液配制方法:7.56g NaHCO3,1.06g Na2CO3,7.36g NaCl,加水定容至1 L。
(2)將FITC溶于DMSO中,濃度為1mg/mL。每次交聯(lián)使用的FITC均應(yīng)新鮮配制,避光。
(3)按P:F(蛋白質(zhì):FITC)=1mg:150μg?的比例將FITC緩慢加入于抗體溶液中,邊加邊輕輕晃動(dòng)使其與抗體混合均勻,暗處4℃反應(yīng)8h。
(4)加入5mol/L的NH4Cl至終濃度50mmol/L,4℃終止反應(yīng)2h。
(5)將交聯(lián)物在PBS中透析四次以上,至透析液清亮。
(6)交聯(lián)物的鑒定
蛋白濃度(mg/mL) = [ A280– 0.31×A495?] / 1.4
F/P比例: 3.1×A495?/ [A280?– 0.31×A495?],該值應(yīng)介于2.5~6.5之間。
(7)FITC交聯(lián)的蛋白應(yīng)置于pH 7.4的磷酸鹽緩沖液中,加入0.1% NaN3、1% BSA,4℃避光保存。
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關(guān)鍵字: 熒光素-5-異氰酸酯 (異構(gòu)體I);異硫氰酸熒光素 (異構(gòu)體I);5-異硫氰酸熒光素 (異構(gòu)體I);5-FITC (異構(gòu)體I)
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