BSA偶聯(lián)棕櫚酸鈉溶液(常溫?zé)o析出、常溫?zé)o沉淀、無需加熱助溶、直接使用、100%濃度準(zhǔn)確)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
1. 實(shí)驗(yàn)用高脂細(xì)胞添加劑的有效成分是棕櫚酸鈉(Sodium palmitate),常溫?zé)o析出、無沉淀、無需水浴助溶、無需培養(yǎng)基預(yù)熱、濃度100%準(zhǔn)確。
2. 本產(chǎn)品經(jīng)0.22μm濾器過濾除菌,可直接加入到含血清(一般為10%)細(xì)胞培養(yǎng)基中誘導(dǎo)高脂損傷。
3. 本產(chǎn)品也可配合高濃度葡萄糖模擬2型糖尿病高糖高脂損傷。
4. 本產(chǎn)品所用溶劑不含NaOH或有機(jī)溶劑,對(duì)細(xì)胞無毒性。
5. 本產(chǎn)品適用于所有類型的細(xì)胞。
6. 本產(chǎn)品可用于誘發(fā)細(xì)胞脂毒性、誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、氧化應(yīng)激、線粒體損傷、細(xì)胞凋亡等,見效果圖1和圖2及參考文獻(xiàn)。
圖1. 高脂細(xì)胞添加劑劑量依賴性誘導(dǎo)H9C2心肌細(xì)胞凋亡。分別給予H9C2心肌細(xì)胞倍比稀釋(1:60,1:30,1:20,1:15)的6mmol/L棕櫚酸鈉(High lipid)、溶劑對(duì)照(Control)或空白對(duì)照(Blank),24小時(shí)后,進(jìn)行Annexin V-FITC(橫坐標(biāo))、碘化丙啶(Propidium iodide, PI,縱坐標(biāo))雙染,采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡(Annexin V-FITC陽(yáng)性、PI陰性,右下象限黑色框內(nèi)),圖A~圖G是流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果,圖H是細(xì)胞凋亡率的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
圖2. 高脂細(xì)胞添加劑劑量依賴性誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡。分別給予小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞倍比稀釋(1:60,1:30,1:20,1:15)的6mmol/L棕櫚酸鈉(High lipid)、溶劑對(duì)照(Control)或空白對(duì)照(Blank),48小時(shí)后,采用Western blotting法檢測(cè)Cleaved caspase-3的蛋白水平。圖A是Western blotting檢測(cè)結(jié)果,β-actin是參照蛋白,圖B是統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
注意事項(xiàng):
1. 本產(chǎn)品中高脂細(xì)胞添加劑及溶劑對(duì)照均為淡黃色清亮液體。
2. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
使用說明:
1. 針對(duì)不同細(xì)胞種類及實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,本產(chǎn)品所用濃度不同,一般與培養(yǎng)基總體積按1:60-1:12稀釋,終濃度為100-500umol/L。
2. 對(duì)于首次使用本產(chǎn)品,建議采用濃度梯度處理細(xì)胞,摸索針對(duì)特定細(xì)胞、達(dá)到特定效果的適宜濃度。處理時(shí)間上可通過鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)初步判斷,一般20-48小時(shí)為宜。
3. 待細(xì)胞生長(zhǎng)至80-100%匯合度時(shí),換成新鮮含血清(一般10%)培養(yǎng)基,按適當(dāng)濃度滴加高脂細(xì)胞添加劑,對(duì)照組加入等量溶劑對(duì)照,輕柔混勻后將細(xì)胞放入細(xì)胞孵箱中繼續(xù)培養(yǎng)
參考文獻(xiàn):
基于“鯤創(chuàng)”產(chǎn)品,客戶已發(fā)表的SCI和Nature有上百篇,您在數(shù)據(jù)庫(kù)搜索“Kunchuang ”或“Kunchuang biotechnology”即可,客戶發(fā)表的部分文章(IF>10,近3年):
》Liu, R. et al. MicroRNA-21 promotes pancreatic β cell function through modulating glucose uptake. Nat Commun. (2022)
》Zhang, J. A.-O. et al. Lipid-induced DRAM recruits STOM to lysosomes and induces LMP to promote exosome release from hepatocytes in NAFLD. Sci Adv. (2021)
》Yamaguchi, A. et al. DHA 12-LOX-derived oxylipins regulate platelet activation and thrombus formation through a PKA-dependent signaling pathway. J Thromb Haemost. (2021)
》Lai, Z. Z. et al. Single-cell transcriptome profiling of the human endometrium of patients with recurrent implantation failure. Theranostics. (2022)
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特別說明
部分用戶自己采用甲醇、乙醇、氫氧化鈉溶液、異丙醇等有機(jī)溶劑配制油酸、棕櫚酸及其鈉鹽,需要注意一下問題:
1)一定要確保溶劑中不含氫氧化鈉、其他堿性試劑及甲醇、乙醇、異丙醇等有機(jī)溶劑,確保溶劑無細(xì)胞毒性。
2)一定要確保試劑在低溫、常溫狀態(tài)下均不產(chǎn)生沉淀、析出或絮狀物質(zhì),確保試劑穩(wěn)定和濃度準(zhǔn)確,由于低溫、室溫出現(xiàn)沉淀,因此,在經(jīng)0.22 uM 濾器過 濾除菌時(shí),絮狀未溶解的軟脂酸(或其他脂肪酸、鈉鹽)是過濾不掉的,會(huì)造成濾下去的溶液里軟脂酸(或其他脂肪酸、鈉 鹽)的終濃度不準(zhǔn)確且無法測(cè)量。而且沉淀或絮狀說明BSA與棕櫚酸鈉、油酸鈉結(jié)合方式不對(duì),導(dǎo)致試劑在誘導(dǎo)損傷或誘導(dǎo)脂滴過程,效果極不穩(wěn)定,經(jīng)常出現(xiàn)無法復(fù)現(xiàn)的情況。
關(guān)鍵字: BSA;偶聯(lián);棕櫚酸鈉;溶液;水溶液;
鯤創(chuàng)科技(Kunchuang Technology Development)(Kunchuang Biotechnology)長(zhǎng)期致力于即用型液體高脂細(xì)胞添加劑的研發(fā)工作,產(chǎn)品涉及油酸BSA水溶液、棕櫚酸BSA水溶液、高糖高脂試劑、脂肪酸水溶液、硬脂酸鈉、脂肪肝細(xì)胞誘導(dǎo)劑、脂肪酸細(xì)胞培養(yǎng)基、亞麻酸溶液、亞油酸溶液等多種高脂添加劑。我司的高脂細(xì)胞添加劑具有無溶劑毒性、無固體析出、可長(zhǎng)期保存的優(yōu)勢(shì)。目前,高脂細(xì)胞添加劑已經(jīng)積累了大量用戶,用戶群涉及北京大學(xué)、浙江大學(xué)、武漢大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院、同濟(jì)大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、第四軍醫(yī)大學(xué)、新疆醫(yī)科大學(xué)、昆明理工大學(xué)、武漢市協(xié)和醫(yī)院、中科院亞熱帶所等上百所全國(guó)范圍的高校、研究所和醫(yī)院。