用途
該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組HSP-70/HSPA9濃度
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人HSP-70/HSPA9抗體包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的人HSP-70/HSPA9會與包被抗體結合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人HSP-70/HSPA9抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素?？谷薍SP-70/HSPA9抗體與結合在包被抗體上的人HSP-70/HSPA9結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，HSP-70/HSPA9濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣品中HSP-70/HSPA9的濃度。
| 反應類型 | 夾心法 |
| 規(guī)格 | 96T |
| 反應時間 | 3.5h |
| 反應性 | Human |
| 檢測方法 | Colormetric |
| 檢測范圍 | 0.78—50 ng/mL |
| 靈敏度 | 0.47 ng/mL |
| 樣本體積 | 100μL |
| 樣本類型 | 血清，血漿或其他生物體液 |
特異性
可檢測樣本中的人HSP-70/HSPA9，且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。
重復性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
典型數(shù)據(jù)
由于實驗操作條件的不同（如操作者、移液技術、洗板技術和穩(wěn)定條件等），標準曲線的OD值會有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實驗者需根據(jù)自己的實驗建立標準曲線。
| (ng/mL) | O.D | Average | Corrected |
|---|
| 50 | 2.384
2.39 | 2.387 | 2.299 |
| 25 | 1.596
1.636 | 1.616 | 1.528 |
| 12.5 | 0.96
0.952 | 0.956 | 0.868 |
| 6.25 | 0.467
0.483 | 0.475 | 0.387 |
| 3.13 | 0.276
0.25 | 0.263 | 0.175 |
| 1.56 | 0.202
0.174 | 0.188 | 0.1 |
| 0.78 | 0.138
0.142 | 0.14 | 0.052 |
| 0 | 0.085
0.089 | 0.086 | -- |
精密度
板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision |
|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean
(ng/mL) | 2.30 | 6.00 | 22.60 | 2.30 | 5.60 | 24.10 |
Standard
deviation | 0.10 | 0.30 | 1.10 | 0.10 | 0.30 | 0.90 |
| C V (%) | 4.35 | 5.00 | 4.87 | 4.35 | 5.36 | 3.73 |
回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|
| Serum (n=8) | 93-108 | 100 |
| EDTA plasma (n=8) | 91-106 | 97 |
| Cell culture media (n=8) | 91-103 | 98 |
線性
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。
|
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) |
|---|
| 1:2 | Range (%) | 84-96 | 89-101 | 89-106 |
| Average (%) | 91 | 94 | 96 |
| 1:4 | Range (%) | 103-119 | 80-92 | 90-104 |
| Average (%) | 108 | 86 | 98 |
| 1:8 | Range (%) | 93-107 | 85-95 | 92-108 |
| Average (%) | 100 | 90 | 99 |
| 1:16 | Range (%) | 100-115 | 83-93 | 93-106 |
| Average (%) | 108 | 87 | 101 |
注意事項：
1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存
2、濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果
3、各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣
4、請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(xnx5)
5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染
6、底物請避光保存。
7、嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準
8、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理
9、.本試劑不同批號組分不得混用。
艾普蒂生物 品牌保障：
1、質(zhì)量保證: 產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，每批次產(chǎn)品必須通過QA、QC檢測才可出庫;
2、技術支持: 技術部5x8小時技術問題及時解答
3、服務周到: 發(fā)貨及時，三個工作日順豐快遞
4、售后無憂:產(chǎn)品質(zhì)量問題包退包換
艾普蒂ELISA試劑盒的優(yōu)勢:
1、高效、靈敏、特異的抗體;
2、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體;
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型!
關鍵字： 人熱休克蛋白70;人 HSP-70 elisa試劑盒;人熱休克蛋白70(HSP-70）;
湖北艾普蒂生物工程有限公司（簡稱：艾普蒂）由在國內(nèi)科研試劑領域有著十幾年從業(yè)經(jīng)驗的專業(yè)技術團隊和企業(yè)管理團隊組建而成，專門從事以抗體、蛋白、細胞、化學品為核心的試劑產(chǎn)品研發(fā)與銷售。
我們長期聚焦于生命科學、生物醫(yī)藥、醫(yī)療診斷、分析檢測等領域，專注于為生命科學和生物技術領域的客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術服務。提供生命科學 試劑、供應鏈服務等，為更多的生命科學科研工作者提供 專業(yè)、全面、安全、快捷的產(chǎn)品和服務。產(chǎn)品覆蓋 基因、蛋白、細胞、組織、動物等水平的各種研究。
致力于成長為我國重要的生命科學試劑和成果轉(zhuǎn)化一體化的領導者、致力于成為中國大型的科研試劑產(chǎn)品供應商之一。