名稱：RIPA裂解液(強(qiáng)) 

規(guī)格：100ml

存儲(chǔ)：冰袋運(yùn)輸，-20℃保存，一年有效。盡量避免反復(fù)凍融，建議分裝后使用。

注意：如發(fā)現(xiàn)RIPA有沉淀，請放室溫半小時(shí)或者常溫水浴使沉淀溶解。

根據(jù)使用量，取每1ml RIPA 加入10ul PMSF，使PMSF的最終濃度為1mM，混勻備用 （PMSF現(xiàn)用現(xiàn)加）。

產(chǎn)品描述 

RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP和ELISA等。

RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多種，根據(jù)其裂解液的強(qiáng)度大致可以分為強(qiáng)、中、弱三類。

RIPA裂解液(強(qiáng))的主要成分為50mM Tris(pH 7.4)，150mM NaCl，1% Triton X-100，1% sodium deoxycholate，0.1% SDS，以及sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA等多種抑制劑。可以有效抑制蛋白降解。

用RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品，可以用PHYGENE的BCA蛋白濃度測定試劑盒(PH0326)測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的去垢劑，不能用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。

使用說明 

(一) 貼壁培養(yǎng)細(xì)胞：

1、 取 Enhanced RIPA Lysis Buffer 室溫溶解混勻， 加入 PMSF，使 PMSF 終濃度為 1mM。

2、 去除貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)液，用 PBS、 NS 或無血清培養(yǎng)液清洗 1 次，低速離心，棄上清，留取沉淀。

3、 按照6孔板每孔加入150～250μl含有PMSF的裂解液的比例， 加入RIPA Lysis Buffer 。移液器輕輕吹打，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。置于冰上或 4℃裂解 15～30min，通常裂解液作用于細(xì)胞 1～3 秒內(nèi)，細(xì)胞就會(huì)被裂解。通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150μl 裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200～250μl。

4、 充分裂解后，10000～12000g，4℃離心 5～10min(如無低溫離心機(jī)，室溫下離心亦可)，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

5、 進(jìn)行后續(xù)的 SDS-PAGE、 Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。