參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：駑巴貝斯蟲PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào)　:　　 EY00P131
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡(jiǎn)短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測(cè)樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注：待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
 中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1遼東楤木皂苷Ⅹ（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Araloside Ⅹ

中國(guó)倉鼠肺細(xì)胞;CHL 卵巢癌細(xì)胞，NIH:OVCAR-3細(xì)胞 L8824細(xì)胞，草魚肝臟細(xì)胞硫酸氨基葡萄糖（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Glucosamine sulfate

胚皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-ESF-1硫酸黃連堿（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Coptisine Sulfate

HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 硫酸軟骨素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Chondroitin sulfate

成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)三甲基[3-(三乙氧基硅基)丙基]氯化銨(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)Trimethyl[3-(triethoxysilyl)propyl]ammonium Chloride

駑巴貝斯蟲PCR檢測(cè)試劑盒己二酸二丙酯(>99.0%(GC))Dipropyl Adipate質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)  英文名稱MouseIerleukin-12,IL-12(P70)ELISAKIT小鼠白介素-12(IL-12)(P70)規(guī)格：96T/48T  人抗核抗體(ANA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

壬二酸二甲酯(>98.0%(GC))Dimethyl Azelate質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)  冰凍切片組織CASPASE-7蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20  小鼠甲狀腺素(T4)試劑盒 Mouse thyroxine,T4 ELISA Kit

己二酸雙(2-丁氧乙基)酯(>97.0%(GC))Bis(2-butoxyethyl) Adipate質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)  RatcoagulationfactorⅩⅢ,FⅩⅢELISA試劑盒大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  異質(zhì)性胞核核糖核蛋白H(hNP H)ELISA試劑盒 ，英文名： hNP H ELISA Kit

油酸乙酯(>70.0%(GC))Ethyl Oleate質(zhì)量規(guī)格：>70.0%(GC)  小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒 ，英文名： ECP ELISA Kit  Mouseacetylcholine,ACHELISA試劑盒小鼠乙酰膽堿(ACH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

水合紅菲繞啉二磺酸鈉水合物Bathophenanthrolinedisulfonic  Di Salt Hydrate質(zhì)量規(guī)格：用于亞鐵離子的測(cè)定  蛋白質(zhì)A標(biāo)記二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升  鴨特定基因序列(Duck)核酸檢測(cè)試劑盒 48T

浴銅靈 (升華提)(>99.0%(HPLC)(T))Bathocuproine (purified by sublimation)質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(HPLC)(T)  RatN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISA試劑盒大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  Humansquamouscellcarcinomarelatedaigen,SCCAgELISA試劑盒人鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原(SCCAg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

齊墩果酸Oleanolic 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，BR  小鼠酰NA合成酶復(fù)合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)ELISA試劑盒 ，英文名： AIMP1 ELISA Kit  ELISAKitaFGF-1小鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1規(guī)格：48T/96T

齊墩果酸(高98%）Oleanolic 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，BR  人胸腺表達(dá)趨化因子(TECK/CCL25)ELISA檢測(cè)試劑盒Humahymusexpressedchemokine,TECKELISAKit 96T/48T  Humanbasicfibroblastgrowthfactor9，bFGF-9ELISAKit人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T