參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：腸道致細胞病變?nèi)斯聝翰《?/span>PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P418
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實驗設置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應孔數(shù)，一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進行加樣：
                                  表 3.各反應孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
 臍帶血單個核細胞 肺成纖維細胞，Hs888Lu細胞 F9(畸胎瘤細胞)林可霉素(U-10149A)質(zhì)量規(guī)格：美國進口Lincomycin (U-10149A)

急性T細胞白血病細胞;Jurkat, Clone E6-1洛美沙星天冬氨酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進口Lomefloxacin, Aspartate

IL18R1 Others Mouse 小鼠 IL18R1 / CD218a 細胞裂解液 (陽性對照) 洛伐他汀羥基酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進口Lovastatin Hydroxy ,  Salt

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA醋酸甲地孕酮-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進口Megestrol Acetate-d3

ROBO2 Others Human  ROBO2 細胞裂解液 (陽性對照) 酸棗仁皂苷B(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Jujuboside B

腸道致細胞病變?nèi)斯聝翰《?/span>PCR檢測試劑盒骨抑制素，人質(zhì)量規(guī)格：>95%,BROsteostatin (human)  大鼠凋亡誘導因子(AIF)ELISA檢測試劑盒Ratapoptosisinducingfactor,AIFELISAKit 96T/48T  Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein4,IGFBP-4ELISA試劑盒人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

骨抑制素（1-5）酰胺，人，牛，狗，大鼠，小鼠，兔，馬質(zhì)量規(guī)格：>95%,BROsteostatin (1-5) amide(human, bovine, dog, horse,mouse, rabbit, rat)  人CD5分子(CD5)試劑盒 Human CD5 ELISA Kit  Humanmicroalbunminuria,MAU/ALBELISAKit人尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

骨抑制素酰胺，人質(zhì)量規(guī)格：>95%,BROsteostatin amide (human)  英文名稱MouseHIF-1αELISAKit小鼠低氧誘導因子-1α(HIF-1α)規(guī)格：96T/48T  大鼠胃泌素(Gasin)ELISA試劑盒 ，英文名： Gasin ELISA Kit

p60 v-結(jié)構(gòu)域（137-157）質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRp60 v-src (137-157)  冰凍切片少突膠質(zhì)細胞(OLIGODENDROCYTE)O4抗體組化染色試劑盒10  人抗乙型肝炎病毒核心IgG抗體(HBcAb-IgG)ELISA檢測試劑盒Humanai-hepatitisBviruscoreIgGaibody,HBc-IgGELISAKit 96T/48T

溶劑綠 7(>85.0%(E))質(zhì)量規(guī)格：>85.0%(E)Pyranin  大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA檢測試劑盒RatEpithelial-Cadherin,E-CadELISAKit 96T/48T  Humanglamicdecarboxylase,GADELISA試劑盒人谷氨酸脫羧酶(GAD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

磺酰熒光素(>75.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>75.0%(HPLC)(T)Sulfonfluorescein  人Toll樣受體5(TLR5)試劑盒 Human TLR5 ELISA Kit  HumanIPO-38ELISAKit人IPO-38蛋白(IPO38)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

N-琥珀基-7-羥基-3-羧酸酯(>95.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T)N-Succinimidyl 7-Hydroxycoumarin-3-carboxylate  英文名稱MouseCPAFELISAKIT小鼠沙眼衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)規(guī)格：96T/48T  大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 ，英文名： TNF-α ELISA Kit

N-琥珀基-7-甲氧基-3-羧酸酯(>98.0%(HPLC)(N))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(N)N-Succinimidyl 7-Methoxycoumarin-3-carboxylate  TOP10鈣轉(zhuǎn)感受態(tài)細菌5X200微升  人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體ELISA檢測試劑盒HumanhistoneH2A-H2B-DNAaoaibodyELISAKit 96T/48T