參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：附紅細(xì)胞體屬通用PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào)　:　　 EY00P441
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡(jiǎn)短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測(cè)樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無(wú)模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注：待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
 胚皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-ESF-1N-氧基長(zhǎng)春新堿質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Vincristine N-Oxide

LLC-MK2細(xì)胞，恒河猴腎細(xì)胞 結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,RKO-E6細(xì)胞 CM-H117腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL4-去乙?；L(zhǎng)春新堿甲代硫酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口4-Desacetyl Vincristine Methosulfate

正常大鼠腎細(xì)胞;NRKN-去甲酰-4-去乙酰長(zhǎng)春新堿質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口N-Desformyl-4-desacetyl Vincristine

IL13RA1 Others Human  IL13Ra1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-甲酰長(zhǎng)春堿(長(zhǎng)春新堿雜質(zhì)G)質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口N-Formyl Leurosine

小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞MM卡巴拉汀代謝產(chǎn)物(NAP226-90) -標(biāo)記d4質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Rivastigmine Metabolite (NAP226-90) - Labeled d4

附紅細(xì)胞體屬通用PCR檢測(cè)試劑盒更昔洛韋-d5Ganciclovir-d5質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口  小鼠組織蛋白酶A(CTSA)ELISA試劑盒 ，英文名： CTSA ELISA Kit  組織樣品組織蛋白酶C(CATHEPSINC)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC))Lauric 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC)  山羊促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)ELISA檢測(cè)試劑盒Goatgrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISAKit 96T/48T  HumanHeatShockProtein60，HSP-60ELISAKit人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

神經(jīng)酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))Nervonic 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)  犬胰島素(INS)試劑盒 Dog Insulin,INS ELISA Kit  人血管活性腸肽(VIP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

十五烷酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))Pentadecanoic 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)  英文名稱Mouse8-iso-ProstaglandinF2a小鼠8-異前列腺素F2α規(guī)格：96T/48T  豬去乙?；囸I激素(dGHRL)試劑盒 Pig deacylated appetite-regulating hormone,dGHRL ELISA kit

人參皂苷Ro（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Ginsenoside Ro  Humaetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit人視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  大鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1(GPBAR1)試劑盒 Rat G protein-coupled bile  receptor 1,GPBAR1 ELISA Kit

肉豆蔻木脂素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Myrislignan  小鼠P-選擇素糖蛋白配體1(PSGL1)ELISA試劑盒 ，英文名： PSGL1 ELISA Kit  CLIAKitforsmActinin-AlphaELISAKit大鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α規(guī)格：48T/96T

肉桂醇（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Cinnamyl alcohol  人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T  乳制品琥珀酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20

肉桂醛(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：GC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品Cinnamaldehyde  大鼠果糖胺(FRA)試劑盒 Rat fructosamin,FRA ELISA kit  ELISAKitCGRP人降鈣素基因相關(guān)肽規(guī)格：48T/96T