中文名稱:山羊痘病毒PCR檢測試劑盒 | 品牌: 一研 |
產(chǎn)地: 國產(chǎn) | 保存條件: -20℃ |
產(chǎn)品類別: PCR試劑盒 PCR檢測試劑盒 | |
型號: EY00P526 |
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:山羊痘病毒PCR檢測試劑盒
型號 : EY00P526
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備
根據(jù)實驗設置陰性質(zhì)控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質(zhì)控 NEG。 注:陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量,計算所需反應孔數(shù),一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數(shù)= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進行加樣:
表 3.各反應孔加樣示例
標準曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
骨肉瘤細胞;HOS苯扎氯銨(標準品)Alkyldimethylbenzylammonium chloride質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法檢查用和容量法含量測定用
成纖維細胞(HMF)(5×105)苯扎氯銨(標準品)Alkyldimethylbenzylammonium chloride質(zhì)量規(guī)格:含量測定用
CM-H112脂肪細胞完全培養(yǎng)基100mL甲硫酸新斯的明(標準品)Neostigmine methyl sulfate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
小鼠漿細胞瘤;MPC-11 小鼠直腸平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL甘草酸二鉀(標準品)Dipotassium glycyrrhizinate質(zhì)量規(guī)格:含量測定
rEPC,大鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓 Rattus尼美舒利(標準品)Nimesulide質(zhì)量規(guī)格:含量測定
山羊痘病毒PCR檢測試劑盒甘氨酰胺鹽酸鹽Glycinamide 質(zhì)量規(guī)格:0.98 ELISAKitFEP人游離原卟啉規(guī)格:48T/96T 唾液過氧化物酶(SP)ELISA試劑盒 ,英文名: SP ELISA Kit
L-羥脯氨酸甲酯鹽酸鹽L-4-Hydroxyproline methyl ester 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠顆粒酶K(GZMK)ELISA試劑盒 ,英文名: GZMK ELISA Kit MouseplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISA試劑盒小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D-亮氨酸甲酯鹽酸鹽D-Leucine methyl ester 質(zhì)量規(guī)格:>98%(T) 人特異性巨噬細胞武裝因子(SMAF)ELISA檢測試劑盒HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISAKit 96T/48T ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISA試劑盒雞白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-纈氨酸L-Valine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠血清素受體2A/5-羥色胺受體2A(5-HT-2A)試劑盒 Rat Serotonin Receptor 2A/5-hydroxyyptamine Receptor 2A(5-HT-2A)ELISA Kit Human15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISAKit人15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
去甲基雷尼替丁質(zhì)量規(guī)格:美國進口Desmethyl Ranitidine Rat vitamin E (VE) ELISA Kit 大鼠維生素E(VE)ELISA試劑盒 humaninhibinbeta-B,InhbbELISA試劑盒人抑制素β-B(Inhbb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
雷尼替丁N-氧化物質(zhì)量規(guī)格:美國進口Ranitidine N-Oxide Human5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit 人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 Humanmelanomaderivedleucinezipperexa-nuclearfactor,MLZEELISAKit人素瘤衍生亮氨酸拉鏈額外核因子(MLZE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
京尼平(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Genipin Humancolony-stimulatingfactor,CSFELISA試劑盒人集落刺激因子(CSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
阿非迪霉素;艾菲地可寧質(zhì)量規(guī)格:>98%,美國進口Aphidicolin from Nigrospora oryzae 組織AURORA-B激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20 人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)試劑盒 Human pro-gasin-releasing peptide,ProGRP ELISA Kit
成立日期 | 2014-06-05 (11年) | 注冊資本 | 100 |
員工人數(shù) | 50-100人 | 年營業(yè)額 | ¥ 100萬以內(nèi) |
主營行業(yè) | 生化試劑,抗體,細胞培養(yǎng),分子生物學,免疫安全 | 經(jīng)營模式 | 工廠,試劑 |
產(chǎn)品名稱 | 價格 | 公司名稱 | 報價日期 | |
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¥1490 |
VIP5年
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|
2024-11-07 | |
¥2990 |
VIP1年
|
上海晶風生物科技有限公司
|
2024-11-08 | |
¥3800 |
VIP3年
|
上海雅吉生物科技有限公司
|
2024-11-08 |