參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:杜克雷嗜血桿菌PCR檢測試劑盒
型號 : EY00P542
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備
根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質(zhì)控 NEG。 注:陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量,計算所需反應(yīng)孔數(shù),一般做 3 個重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進行加樣:
表 3.各反應(yīng)孔加樣示例
標準曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
表皮色素細胞-中色素(HEM)( 5×105 ) MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Mouse利福昔明質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,可用于細胞培養(yǎng)Riimin
CM-H008氣管上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL利福昔明(標準品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品Riimin
ADAM17 Others Rat 大鼠 ADAM17 細胞裂解液 (陽性對照) 比卡魯胺(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Bicalutamide
原代神經(jīng)膠質(zhì)細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml白消安質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP,可用于細胞培養(yǎng)Busulfan/Myleran
6T-CEM細胞,T細胞白血病細胞 綠色熒光蛋白標記小鼠子細胞,U14-GFP細胞 前脂肪細胞分化培養(yǎng)基PADM-prf白消安(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Busulfan/Myleran
杜克雷嗜血桿菌PCR檢測試劑盒富馬酸福莫特羅 (二水)Formoterol fumarate 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,二水合物 小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA檢測試劑盒Mouseplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit 96T/48T ELISAKitIL1Ra小鼠白介素1受體拮抗劑規(guī)格:48T/96T
富馬酸福莫特羅(無水)Formoterol fumarate 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,無水,EP 人鈣激活中性蛋白酶1(CAPN1)試劑盒 Human calpain 1,CAPN1 ELISA Kit FishThyroxine,T4ELISAKit魚類甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
法羅培南(鈉)(2.5水)Faropenem 質(zhì)量規(guī)格:度>99.0%,BR RatIerleukin11,IL-11ELISAKit大鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人金葡菌腸(SE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
法羅培南鈉(標準品)Faropenem 質(zhì)量規(guī)格:標準品用于含量測定 CASPASE-4蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25 小鼠胱天蛋白酶10(CASP-10)試劑盒 Mouse Caspase-10,CASP10 ELISA kit
曲格列酮Troglitazone(CS-045)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR ELISAKitPro-ANP人前心肽規(guī)格:48T/96T 神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(G1)ELISA試劑盒 ,英文名: G1 ELISA Kit
2-氨基-4'-氟二苯甲酮2-Amino-4'-fluorobenzophenone 質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠肌原纖蛋白1(FBN1)ELISA試劑盒 ,英文名: FBN1 ELISA Kit Porcineinsulin-likegrowthfactors-1,IGF-1ELISA試劑盒豬胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-氨基-4'-氯二苯甲酮2-amino-4'-chlorobenzophenone 質(zhì)量規(guī)格:大于98%,化學(xué) 人β-促脂素(β-LPH)ELISA檢測試劑盒Humanβ-lipoopichormone,β-LPHELISAKit 96T/48T HumanAdenovirusIgM,ADV-IgMELISA試劑盒人腺病毒IgM(ADV-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
原百部堿(標準品)Protostemonine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 大鼠細胞色素P450,家族7亞科A多肽1(CYP7A1)試劑盒 Rat cytochrome P450, family 7,subfamily A,polypeptide 1,CYP7A1 ELISA kit Humanai-teichoicaibody,TAELISAKit人抗1壁酸抗體(TA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
關(guān)鍵字: 杜克雷嗜血桿菌核酸檢測試劑盒;杜克雷嗜血桿菌PCR試劑盒;杜克雷嗜血桿菌PCR擴增試劑盒;杜克雷嗜血桿菌PCR熒光探針試劑盒;杜克雷嗜血桿菌通用型PCR試劑盒;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務(wù)于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領(lǐng)域,運用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務(wù)生物科技領(lǐng)域的科學(xué)研究人員。
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