參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：日本腦炎病毒乙型腦炎病毒PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P645
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標(biāo)準曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
 TOV21G卵巢癌細胞 Human ovarian cancer cell line TOV21G 1640+10FBS%蛋白酶3底物1m，熒光質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRCaspase 3 Substrate 1m(Apopain), fluorogenic; Ac-DEVD-AMC

NRG1 Protein Human 重組 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD)抗菌肽B;天蠶絲抗菌肽質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRCecropin B

MX-1(癌細胞) 5×106cells/瓶×2 腮腺細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)卡律蝎質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRCharybdotoxin

小氣道平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)促皮質(zhì)素釋放因子，綿羊質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRCorticotropin Releasing Factor,ovine

IL9 Others Human  IL-9 / Ierleukin-9 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 蛋白激酶C（19-36）；蛋白激酶C選擇性抑制蛋白質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRProtein Kinase C (19-36);Protein Kinase C Selective Inhibitor Protein

日本腦炎病毒乙型腦炎病毒PCR檢測試劑盒番茄堿（標(biāo)準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準品Tomatidine  ELISAKitHLA-B27人類白細胞抗原B27規(guī)格：48T/96T  倉鼠脂聯(lián)素,含C1Q和膠原域(ADIPOQ)試劑盒 Hamster adiponectin,C1Q and collagen domain coaining(ADIPOQ)ELISA kit

左旋樟腦（標(biāo)準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定(-)-CAMPHOR  小鼠AMPA離子能谷酸受體2(GRIA2)ELISA試劑盒 ，英文名： GRIA2 ELISA Kit  CLIAKitforRatSlit2ELISAKit大鼠Slit2規(guī)格：48T/96T

11-羰基-β-乙酰乳香酸（標(biāo)準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定3-ACETYL-11-KETO-BETA-BOSWELLIC   人抗抗體(AsAb)ELISA檢測試劑盒Humanai-spermaibody,AsAbELISAKit 96T/48T  石蠟切片網(wǎng)硬蛋白(RETICULIN)染色試劑盒50

3',4',5',5,7-五甲氧基黃酮（標(biāo)準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定3',4',5',5,7-PENTAMETHOXYFLAVONE  大鼠分泌型1脂酶A2(sPLA2)試劑盒 Rat secreted phospholipase A2,sPLA2 ELISA Kit  ELISAKitBMP-6人骨形成蛋白6規(guī)格：48T/96T

芘(標(biāo)準品)Pyrene質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準品  人外顯肽(extein)ELISA檢測試劑盒HumanexteinELISAKit 96T/48T  ELISAKitIgG兔子球蛋白G規(guī)格：48T/96T

(-)-鹽酸東莨菪堿(標(biāo)準品)(?)-Scopolamine 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準品,99.0%  大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)試劑盒 Rat insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA Kit  ChickenIerferonα,IFN-αELISAKit雞α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

十四烷(標(biāo)準品)Tetradecane質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準品,≥99.5%(GC)  英文名稱Human8-hydroxy-2-deoxyguanosineELISAKit人8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)規(guī)格：96T/48T  人庚型肝炎病毒IgM(HGV-IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

苯噻啶Pizotifen質(zhì)量規(guī)格：美國進口  糞便DNA高質(zhì)化試劑盒20  小鼠白介素21(IL-21)試劑盒 Mouse Ierleukin 21,IL-21 ELISA Kit