參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:折光馬爾太蟲PCR檢測試劑盒
型號 : EY00P707
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質控 NEG 的制備
根據(jù)實驗設置陰性質控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質控 NEG。 注:陰性質控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量,計算所需反應孔數(shù),一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數(shù)= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進行加樣:
表 3.各反應孔加樣示例
標準曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
SERPINB3C Others Mouse 小鼠 Serpinb3c 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 羥乙基磺酸質量規(guī)格:>80%,粘狀液體HES
EB病毒轉化的B細胞;KM9401DIPSO.Na;3-[N-N-雙(2-羥乙基)氨基]-2-羥基丙磺酸單鈉鹽質量規(guī)格:>98%DIPSO Mono
PANC-1細胞,胰腺癌細胞 鼻咽癌細胞系,SUNE-1亞株6-10B細胞 CL-0339G-401(腎癌Wilms細胞)5×106cells/瓶×2DIPSO; 3-[N-N-雙(2-羥乙基)氨基]-2-羥基丙磺酸 質量規(guī)格:>99%DIPSO
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr2,3-二丙磺酸鈉質量規(guī)格:>95%,一水合物DMPS
LEFTY2 Others Human Lefty A 細胞裂解液 (陽性對照) 羥甲基達沙替尼質量規(guī)格:美國進口Hydroxymethyl Dasatinib
折光馬爾太蟲PCR檢測試劑盒二氟尼柳(標準品)Diflunisal質量規(guī)格:含量測定 RatIerleukin12,IL-12/P40ELISAKit大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
丹芝醇B(標準品)Ganoderol B質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 CASPASE-4蛋白共沉淀分析試劑盒5 小鼠骨粘連蛋白(ON)試劑盒 Mouse osteonectin,ON ELISA Kit
富勒烯提取物,C60(含約20%的C70),球提取物ullerene Extract, C60 (contains ca. 20% C70)質量規(guī)格:>70.0%(HPLC) MouselymphocytefactorELISA試劑盒小鼠細胞因子ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 合成酶(NOS)ELISA試劑盒 ,英文名: NOS ELISA Kit
富勒烯 C60,球 C60Fullerene C60質量規(guī)格:>99.0%(HPLC) 小鼠趨化因子配體1(CCL1)ELISA試劑盒 ,英文名: CCL1 ELISA Kit MouseBonemorphogeneticprotein2,BMP-2ELISA試劑盒小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鎳粉(>99.5%,SP)質量規(guī)格:>99.5%,SPNickel powder Humanneuronalnuclearaoaibody,ANNA-1/HuELISAKit人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 血鋅濃度測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
耐爾藍A(>65%,BS)質量規(guī)格:>65%,BSNile blue A 兔血栓素B2(TXB2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Ratthioredoxieductase,xRELISA試劑盒大鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
N2-異丁酰-2'-脫氧鳥甙質量規(guī)格:>98%,BRibu-dG Rat nicotinic acetylcholine receptor (N-AChR) ELISA Kit 大鼠型乙酰膽堿受體(N-AChR)ELISA試劑盒 humanlectin-galactosebinding-soluble3,Lgals3ELISA試劑盒人可溶性半乳糖苷結合凝集素3(Lgals3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
N-苯甲酰-2'-脫氧胞苷質量規(guī)格:>98%,BRbz-dC Humaotavirus,RVIgMELISAKit 人輪狀病毒(RV)IgMELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 Humanneuophilactivatingprotein-2,NAP-2ELISAKit人中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
關鍵字: 折光馬爾太蟲核酸檢測試劑盒;折光馬爾太蟲PCR試劑盒;折光馬爾太蟲PCR擴增試劑盒;折光馬爾太蟲PCR熒光探針試劑盒;折光馬爾太蟲通用型PCR試劑盒;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領域,運用生物技術和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機構、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質的產(chǎn)品,服務生物科技領域的科學研究人員。
公司具有對普通貨物、冷藏及冷凍倉庫的存儲、包裝及運輸能力。
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