參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：多態(tài)小小菌PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào)　:　　 EY00P726
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡(jiǎn)短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測(cè)樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無(wú)模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注：待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
 RK2 Others Canine 狗 kB / RK2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 普伐他汀內(nèi)酯質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Pravastatin Lactone

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO波尼龍-d6質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Prednisolone-d6

Tul-1細(xì)胞，肺癌細(xì)胞系 大鼠肝上皮樣干細(xì)胞,WB-F344細(xì)胞 T-101B胰蛋白酶(含100mL 酶解緩沖液)10mL波尼龍21-半琥珀酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Prednisolone 21-hemisuccinate  salt

SK-MES-1(肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×26α-甲基波尼龍21-醋酸質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口6α-Methylprednisolone 21-Acetate

HUVEC-c pre-screened 預(yù)選型正常臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC) 500,000cells 大隱靜脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)偏鋁酸鈉(分子生物學(xué)級(jí))質(zhì)量規(guī)格：分子生物學(xué)級(jí) metaaluminate

多態(tài)小小菌PCR檢測(cè)試劑盒恩曲他濱Emtricitabine質(zhì)量規(guī)格：>99%,核苷逆轉(zhuǎn)錄酶(NRTI)抑制劑  Rat somal cell derived factor 1A (SDF-1a/CXCL12) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒  ELISAKitPAL小鼠L苯氨酸解氨酶規(guī)格：48T/96T

肌酐（標(biāo)準(zhǔn)品）Creatinine質(zhì)量規(guī)格：供檢查用  Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCPELISAKit 人抗環(huán)胍氨酸肽抗體(CCP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  ChickenPlateletFactor4,PF-4ELISAKit雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

雙氯芬酸鉀（標(biāo)準(zhǔn)品）Diclofenac Potassium質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定  HeneggImmunoglobulinofYolk,IgYELISA試劑盒雞卵黃球蛋白(IgY)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人激活素A(Activin A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

依西美坦（標(biāo)準(zhǔn)品）Exemestane質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定  真菌/酵母細(xì)胞細(xì)胞壁分離試劑盒20  小鼠二?；视?/span>(DAG/DG)試劑盒 Mouse diacyl glycerol,DAG/DG ELISA Kit

鈮標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)Niobium standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml  小鼠細(xì)胞色素P450家族成員7A1(CYP7A1)ELISA試劑盒 ，英文名： CYP7A1 ELISA Kit  ELISAKitT3小鼠三甲狀腺原氨酸規(guī)格：48T/96T

鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL，基體:1%HNO3)Nickel Standard質(zhì)量規(guī)格：100μg/mL，基體:1%HNO3  兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA檢測(cè)試劑盒Rabbitlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit 96T/48T  HumanAquaporin2，AQP-2ELISAKit人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑：水)Potassium standard質(zhì)量規(guī)格：500mg/L,溶劑：水  牛血小板活化因子(PAF)試劑盒 Bovine platelet activating factor,PAF ELISA Kit  人卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,基體:1%HCl) Potassium Solution質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mL,基體:1%HCl  英文名稱HumansP-selectinELISAKit人可溶性sP-選擇素(sP-selectin)ELISAKit規(guī)格：96T/48T  小鼠(EPI)試劑盒 Mouse Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit