參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：牛眼莫拉氏菌PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P734
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
 Raji，Butt's瘤細(xì)胞N-油酰-D-赤-鞘氨醇質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口D-erythro-Sphingosine, N-Oleoyl-

結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 320DM [COLO320DM] 大鼠腎小管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLD-赤-鞘氨醇C-20質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口D-erythro-Sphingosine C-20

MLTC-1 小鼠間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞L-蘇型-鞘氨醇C-18質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口L-threo-Sphingosine C-18

EDA2R Others Human  EDA2R / XEDAR / TNFRSF27 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) C16 神經(jīng)酰胺(N-十六烷酰鞘氨醇,D-赤)質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口C16 Ceramide (N-Palmitoylsphingosine, D-erythro)

小鼠垂體瘤細(xì)胞;GT1-1二氯酞菁錫(IV)質(zhì)量規(guī)格：Tin(IV) Phthalocyanine Dichloride

牛眼莫拉氏菌PCR檢測試劑盒厄貝沙坦質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,Angiotensin II受體抑制劑Irbesartan  人肌球蛋白(Myosin)ELISA檢測試劑盒HumanMyosinELISAKit 96T/48T  HumanaoaibodiesagainsttheC-terminaldomainⅣ,ACAST-DⅣELISA試劑盒人抗鈣蛋白酶抑素抗體(ACAST-DⅣ)ELISAit規(guī)格：96T/48T

5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基甲基)-胸苷-3'-O-丁二酸質(zhì)量規(guī)格：BR,原裝進(jìn)口5'-O-(4,4'-Dimethoxytrityl)-thymidine-3'-O-succinic   大鼠松弛肽/松弛素1(RLN1)試劑盒 Rat relaxin 1,RLN1 ELISA kit  Humancoicoopin-releasingfactor，CRF人促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

120；7-氨基-4-甲基(AMC)質(zhì)量規(guī)格：>97%7-Amino-4-methylcoumarin   英文名稱RatCPAFELISAKIT大鼠沙眼衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)規(guī)格：96T/48T  人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Duvelisib (IPI-145)質(zhì)量規(guī)格：>98%,選擇性的PI3K δ/γ抑制劑IPI-145 (INK1197)  活化部分凝血活酶時間(APTT)比色法檢測試劑盒20  兔超氧化物歧化酶1,可溶(SOD1)試劑盒 Rabbit superoxide dismase 1,soluble(SOD1)ELISA kit

尼羅替尼（標(biāo)準(zhǔn)品）Nilotinib質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品  牛血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒 Bovine Serum amyloid A,SAA ELISA Kit  人瘤病毒16(HPV-16)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

螺旋霉素Spiramycin質(zhì)量規(guī)格：>3900IU/MG,EP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)  英文名稱HumanAEA(IgG,M)ELISAKit人抗子宮內(nèi)膜抗體(AEA)規(guī)格：96T/48T  小鼠胰島素(INS)試劑盒 Mouse Insulin,INS ELISA Kit

螺旋霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Spiramycin質(zhì)量規(guī)格：含量測定,標(biāo)準(zhǔn)品  等電聚焦蛋白電泳(IEF)10倍陰極電泳緩沖液500毫升  腦膜炎奈瑟菌C群(NM-C)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

螺內(nèi)酯Spironolactone質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP 32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)  RatOncostatin-M,OSMELISA試劑盒大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  HumanproteinkinaseB,PKBELISA試劑盒人蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T