中文名稱:黏孢子蟲屬通用PCR檢測試劑盒 | 品牌: 一研 |
產地: 國產 | 保存條件: -20℃ |
產品類別: PCR試劑盒 PCR檢測試劑盒 | |
型號: EY00P799 |
參數規(guī)格:
產品名稱:黏孢子蟲屬通用PCR檢測試劑盒
型號 : EY00P799
產品規(guī)格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質控 ERC 的制備
根據待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質控 NEG 的制備
根據實驗設置陰性質控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質控 NEG。 注:陰性質控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1,根據所要檢測的標準曲線及待測樣本數量,計算所需反應孔數,一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據反應孔數計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應孔數+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應孔數+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應孔數+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進行加樣:
表 3.各反應孔加樣示例
標準曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
Neuro-2A細胞,腦神經瘤細胞 肝癌細胞,HepG2.2.1.5細胞 CM-M130小鼠肝外膽管上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL芐星青霉素G質量規(guī)格:美國進口Penicillin G benzathine salt
黃胸鼠肺成纖維細胞;YCR尼泊金異丁酯-d9質量規(guī)格:美國進口Isobutyl-d9 Paraben
EFNA5 Others Human EphrinA5 細胞裂解液 (陽性對照) 尼泊金異丁酯質量規(guī)格:美國進口Isobutyl Paraben
原代骨細胞特制基礎無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml尼泊金異丙酯質量規(guī)格:美國進口Isopropyl Paraben
IL18R1 Others Rat 大鼠 IL18R1 細胞裂解液 (陽性對照) 普樂沙福,CXCR抑制劑質量規(guī)格:>99%,CXCR4趨化因子受體拮抗劑Plerixafor,AMD3100
黏孢子蟲屬通用PCR檢測試劑盒(AR)Iodine質量規(guī)格:>99.5%,AR 小鼠主要堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 ,英文名: MBP ELISA Kit 組織乙酰化組蛋白H3染色質沉淀分析(CHIP)試劑盒10
乙醇脫氫酶ADA, Alcohol dehydrogenase 質量規(guī)格:>300U/mg,BR 犬三甲狀腺原氨酸(T3)ELISA檢測試劑盒Caninei-iodothyronine,T3ELISAKit 96T/48T humanglamicdecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
吐溫80(化學)Tween-80質量規(guī)格:CP 犬透明質酸酶4(HAase 4)試劑盒 Canine Hyaluronidase 4,HAase 4 ELISA Kit 人?;碳さ鞍?/span>(ASP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
乙酸二丙基銨(約0.5mol/L的水溶液)[離子對色譜級]IPC-DPAA (ca. 0.5mol/L in Water)質量規(guī)格:用于液相色譜-質譜的離子對試劑 英文名稱HumaumornecrosisfactorsolublereceptorⅠELISAKIT人腫瘤壞死因子可溶性受體I(TNFsRI)規(guī)格:96T/48T 豬巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒 Porcine macrophage inflammatory protein 1α,MIP-1α ELISA Kit
米諾地爾質量規(guī)格:>98%Minoxidil 雞球蛋白G(IgG)ELISA檢測試劑盒ChickenImmunoglobulinG,IgGELISAKit 96T/48T 氣生蘭(epiphytic)移植維護培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
米諾地爾(標準品)質量規(guī)格:>98%,標準品Minoxidil 人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)試劑盒 Human procollagen Ⅰ N-terminal peptide,PⅠNP ELISA Kit ELISAKitHBcAb-IgM人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗體規(guī)格:48T/96T
米諾地爾(硫酸鹽)敏樂啶質量規(guī)格:>99.0%Minoxidil Sulfate 英文名稱MouseFASLELISAKit小鼠FASL規(guī)格:96T/48T 大鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
米諾地爾(硫酸鹽)敏樂啶(標準品)質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Minoxidil Sulfate 冰凍切片組織PI-3KINASEP110BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 人血清剝奪反應相關蛋白(SDPR)試劑盒 Human SDPR ELISA Kit
成立日期 | 2014-06-05 (11年) | 注冊資本 | 100 |
員工人數 | 50-100人 | 年營業(yè)額 | ¥ 100萬以內 |
主營行業(yè) | 生化試劑,抗體,細胞培養(yǎng),分子生物學,免疫安全 | 經營模式 | 工廠,試劑 |
產品名稱 | 價格 | 公司名稱 | 報價日期 | |
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¥1490 |
VIP5年
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上海康朗生物科技有限公司
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2024-11-07 | |
¥2990 |
VIP1年
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上海晶風生物科技有限公司
|
2024-11-08 | |
¥2490 |
VIP5年
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上海澤葉生物科技有限公司
|
2024-11-07 | |
¥2899 |
上海撫生實業(yè)有限公司
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2022-08-19 |