參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:雞類圓線蟲PCR檢測試劑盒
型號 : EY00P1124
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備
根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質(zhì)控 NEG。 注:陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量,計算所需反應(yīng)孔數(shù),一般做 3 個重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進行加樣:
表 3.各反應(yīng)孔加樣示例
標準曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
JEG-3/VP16細胞,絨癌細胞耐藥株 新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞,NBTF細胞 羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞HAMSC羅丹明123質(zhì)量規(guī)格:用于熒光標記Rhodamine 123
IM-9(外周血B細胞) 5×106cells/瓶×2曲美布汀堿質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTrimebutine base
95-D(高轉(zhuǎn)移肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H099上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL 胚肺成纖維細胞;CCC-HPF-1環(huán)草隆(標準品)質(zhì)量規(guī)格:分析標準品Siduron
CM-R039大鼠胃粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL西瑪津(標準品)質(zhì)量規(guī)格:分析標準品Simazine
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 西瑪津標準溶液(10μg/ml,u=5%)質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=5%Simazine solution
雞類圓線蟲PCR檢測試劑盒大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Emodin-8-glucoside ELISAKitsCKR人可溶性細胞因子受體規(guī)格:48T/96T ADPG焦1酸化酶(AGP)測試盒 紫外分光光度法 25管/24樣
異蓮心堿(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Isoliensinine 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)基端肽(XⅠ)ELISA試劑盒 ,英文名: XⅠ ELISA Kit RaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISA試劑盒大鼠正常T細胞表達和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蓮心堿高氯酸鹽(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Liensinine Perchlorate 人游離三甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA檢測試劑盒HumanFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit 96T/48T HumanIerleukin17,IL-17ELISA試劑盒人白介素17(IL-17)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丁烯基苯酞(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品川芎提取,液體3-Butylidenephthalide 大鼠兒茶酚抑素試劑盒 Rat catestatin ELISA Kit Humanmucosaeassociatedepitheliachemokine,MECELISAKit人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氯前列醇鈉(D型)D-Cloprostenol 質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 50倍Dendha核酸雜交封閉溶液100毫升 主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA試劑盒 ,英文名: MHCⅠ/HLAⅠ ELISA Kit
氯前列醇鈉(DL型)DL-Cloprostenol 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP34 Mouseferritin,FEELISA試劑盒小鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T humanansfusionansmittedvirus,TTVELISA試劑盒人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸川芎嗪(標準品)Ligustrazine HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠維生素A(VA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 ELISAKitIgM小鼠球蛋白M規(guī)格:48T/96T
鹽酸川芎嗪Ligustrazine HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Rat osteonectin (ON) ELISA Kit 大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒 Humanai-nucleolusaibody,ANAELISAKit人抗核仁抗體(ANA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
關(guān)鍵字: 雞類圓線蟲核酸檢測試劑盒;雞類圓線蟲PCR試劑盒;雞類圓線蟲PCR擴增試劑盒;雞類圓線蟲PCR熒光探針試劑盒;雞類圓線蟲通用型PCR試劑盒;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務(wù)于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領(lǐng)域,運用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務(wù)生物科技領(lǐng)域的科學(xué)研究人員。
公司具有對普通貨物、冷藏及冷凍倉庫的存儲、包裝及運輸能力。
公司將始終堅持信譽立業(yè)、以人為本、質(zhì)量保證、誠信服務(wù)的宗旨,不斷拼搏,開拓進取,與各界朋友攜手共創(chuàng)美好未來。