參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：雞類圓線蟲PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào)　:　　 EY00P1124
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡(jiǎn)短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測(cè)樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注：待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
 JEG-3/VP16細(xì)胞，絨癌細(xì)胞耐藥株 新生牛眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞,NBTF細(xì)胞 羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HAMSC羅丹明123質(zhì)量規(guī)格：用于熒光標(biāo)記Rhodamine 123

IM-9(外周血B細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2曲美布汀堿質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTrimebutine base

95-D(高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H099上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 胚肺成纖維細(xì)胞;CCC-HPF-1環(huán)草隆(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Siduron

CM-R039大鼠胃粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL西瑪津(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Simazine

HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 西瑪津標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=5%)質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=5%Simazine solution

雞類圓線蟲PCR檢測(cè)試劑盒大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Emodin-8-glucoside  ELISAKitsCKR人可溶性細(xì)胞因子受體規(guī)格：48T/96T  ADPG焦1酸化酶(AGP)測(cè)試盒 紫外分光光度法 25管/24樣

異蓮心堿（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Isoliensinine  小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)基端肽(XⅠ)ELISA試劑盒 ，英文名： XⅠ ELISA Kit  RaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISA試劑盒大鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

蓮心堿高氯酸鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Liensinine Perchlorate  人游離三甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit 96T/48T  HumanIerleukin17,IL-17ELISA試劑盒人白介素17(IL-17)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

丁烯基苯酞（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品川芎提取,液體3-Butylidenephthalide  大鼠兒茶酚抑素試劑盒 Rat catestatin ELISA Kit  Humanmucosaeassociatedepitheliachemokine，MECELISAKit人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氯前列醇鈉(D型）D-Cloprostenol 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%  50倍Dendha核酸雜交封閉溶液100毫升  主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA試劑盒 ，英文名： MHCⅠ/HLAⅠ ELISA Kit

氯前列醇鈉(DL型）DL-Cloprostenol 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP34  Mouseferritin,FEELISA試劑盒小鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  humanansfusionansmittedvirus,TTVELISA試劑盒人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鹽酸川芎嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Ligustrazine HCl質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品  小鼠維生素A(VA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  ELISAKitIgM小鼠球蛋白M規(guī)格：48T/96T

鹽酸川芎嗪Ligustrazine HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  Rat osteonectin (ON) ELISA Kit 大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒  Humanai-nucleolusaibody,ANAELISAKit人抗核仁抗體(ANA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T