服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 型號 |
帶絳蟲通用PCR檢測試劑盒 | 50T | EY00P1142 |
組成及試劑配制
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
實驗外包
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
IL1B Protein Rat 重組大鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (mature form)L-脯氨酸芐酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Proline benzyl ester
NCI-H524(非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 HUVEC(臍靜脈血管內(nèi)皮細胞)L-精氨酸-L-谷氨酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Arginine L-glutamate
CL-0336FC33(胚胎腎細胞(Asp-2基因修飾))5×106cells/瓶×2L-精氨酸-α-酮戊二酸鹽(2:1)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Arginine AKG 2:1
CS Others Human Ciate syhase / CS 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-谷氨酸-5-甲酯質(zhì)量規(guī)格:0.98L-Glutamic 5-methyl ester
腸平滑肌細胞總RNAHISMC NAN-乙酰-L-亮氨酸質(zhì)量規(guī)格:>99%N-Acetyl-L-leucine
醋酸潑尼松龍(標準品)Prednisolone acetate質(zhì)量規(guī)格:含量測定 ELISAKitNGAL人中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白規(guī)格:48T/96T 細菌(BV)ELISA試劑盒 ,英文名: BV ELISA Kit
醋酸曲安奈德(標準品)xx質(zhì)量規(guī)格:含量測定 小鼠硫氧還蛋白還原酶1(xR1)ELISA試劑盒 ,英文名: xR1 ELISA Kit MouseLaminin,LNELISA試劑盒小鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
達那唑(標準品)Danazol質(zhì)量規(guī)格:含量測定 人上皮特異性抗原(ESA)ELISA檢測試劑盒Humanepithelialspecificaigen,ESAELISAKit 96T/48T ELISAKitEGF兔子表皮生長因子規(guī)格:48T/96T
氨苯蝶啶(標準品)Triamterene質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定 大鼠胰蛋白酶(ypsin)試劑盒 Rat ypsin ELISA Kit Chickenverylowdensitylipoprotein,VLDLELISAKit雞極低密度脂蛋白(VLDL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
帶絳蟲通用PCR檢測試劑盒氯化羅丹明110;羅丹明110Rhodamine 110 chloride質(zhì)量規(guī)格:>99% 96孔板細胞基因組DNA分離試劑盒10 脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA試劑盒 ,英文名: LAM ELISA Kit
羅丹明123Rhodamine 123質(zhì)量規(guī)格:用于熒光標記 MouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISA試劑盒小鼠糖原1酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T HumanVitaminB12,VB12ELISA試劑盒人維生素B12(VB12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
曲美布汀堿Trimebutine base質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒 ,英文名: CDT ELISA Kit ELISAKitCCA小鼠結(jié)腸癌抗原規(guī)格:48T/96T
麗春紅SPonceau S質(zhì)量規(guī)格:BS 小鼠白介素-5(IL-5)ELISA檢測試劑盒MouseIerleukin5,IL-5ELISAKIT 96T/48T HumanangiotensionⅡreceptor1,ANGⅡR-1ELISAKit人血管緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
使用方法:
一、樣品DNA的制備用自選方法提取細菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管,分別為6,5,4,3,2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL純水(*用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對照。6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR(見下步),每個樣品做3次重復。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
關(guān)鍵字: 帶絳蟲核酸檢測試劑盒;帶絳蟲通用型PCR試劑盒;帶絳蟲PCR試劑盒;帶絳蟲PCR擴增試劑盒;帶絳蟲PCR熒光探針試劑盒;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領(lǐng)域,運用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務生物科技領(lǐng)域的科學研究人員。
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