參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：斑點(diǎn)病密螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào)　:　　 EY00P1170
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡(jiǎn)短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測(cè)樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注：待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
 ICAM1 Others Human  ICAM-1 / CD54 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 苉(升華提)質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC)Picene (purified by sublimation)

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA5,6,11,12-四苯基并四苯(升華提)質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)5,6,11,12-Tetraphenylnaphthacene (purified by sublimation)

13. 肝臟細(xì)胞系統(tǒng)1,2,3,4,8,9,10,11,15,16,17,18,22,23,24,25-十六氟酞菁銅(II)(以升華法化)質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N)(T)1,2,3,4,8,9,10,11,15,16,17,18,22,23,24,25-Hexadecafluorophthalocyanine Copper(II) (purified by sublimation)

CL-0075DU 145(前列腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×23,4,9,10-苝四羧酸二酐(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)3,4,9,10-Perylenetetracarboxylic Dianhydride

小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞;MC3T3-E1 大鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL苔酚葡萄糖苷；地衣二醇葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%，標(biāo)準(zhǔn)品Orcinol glucosid

斑點(diǎn)病密螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒促皮質(zhì)素釋放因子，綿羊Corticotropin Releasing Factor,ovine質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR  MouseNeuroophin4,-4ELISA試劑盒小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒 ，英文名： VCAM-1/CD106 ELISA Kit

蛋白激酶C（19-36）；蛋白激酶C選擇性抑制蛋白Protein Kinase C (19-36);Protein Kinase C Selective Inhibitor Protein質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR  小鼠凝血因子Ⅶ(F7)ELISA試劑盒 ，英文名： F7 ELISA Kit  Mouseeosinophilcationicprotein,ECPELISA試劑盒小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

蛋白激酶C（530-558）Protein Kinase C (530-558)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR  人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanEpithelialneuophilactivatingpeptide78,ENA-78ELISAKit 96T/48T  ELISAKitCH50豚鼠血清總補(bǔ)體規(guī)格：48T/96T

甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白拼接同種型3（104-173），人pTH-Related Protein Splice Isoform 3 (140-173) (human)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR  大鼠孕激素/孕酮(PROG)試劑盒 Rat Progesterone,PROG ELISA kit  Chickenfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit雞促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

洛匹那韋代謝產(chǎn)物M-3/M-4質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Lopinavir Metabolite M-3/M-4  Rat P-selectin (omein) ELISA Kit 大鼠網(wǎng)膜素(omein)ELISA試劑盒  HumanImmunoglobulinA,IgAELISA試劑盒人球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

褪素-d4質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Melatonin-d4  Humahyroopin-releasinghormone,HELISAKIT 人促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  HumanMaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鹽酸美法侖質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Melphalan   HumanCollagen-likeBioproteinⅡ,HCBⅡELISA試劑盒人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  大鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子1(Smad1)ELISA試劑盒 ，英文名： Smad1 ELISA Kit

7-單一去甲基米諾環(huán)素質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口7-Monodemethyl Minocycline  組織Akt/PKB激酶總活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20  人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanLymeIgGELISAKit 96T/48T