參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：胎兒滴蟲PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P1186
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應孔數(shù)，一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進行加樣：
                                  表 3.各反應孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
 HRG Others Human  HPRG / HRG 細胞裂解液 (陽性對照) 琥乙紅霉素（標準品）質(zhì)量規(guī)格：雜質(zhì)檢查Erythromycin ethylsuccinate

BPH-1, 前列腺增生細胞灰黃霉素（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Griseofulvin

FSTL5 Others Human  FSTL5 細胞裂解液 (陽性對照) Tivantinib(ARQ197)質(zhì)量規(guī)格：>98%，c-Met抑制劑Tivantinib, ARQ 197

胚腎細胞;293FT3-乙氧基－4－羥基苯（標準品）質(zhì)量規(guī)格：系統(tǒng)適應性Ethyl vanillin

豹貓肺成纖維樣細胞;LCL4 幼倉鼠腎細胞，BHK細胞 DCS細胞，小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞鹽酸奈福泮（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Nefopam HCl

胎兒滴蟲PCR檢測試劑盒垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27（6-27），人，雞，小鼠，豬，大鼠質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRPACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)  人17羥孕酮(17-OHP)ELISA檢測試劑盒Human17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISAKit 96T/48T  HumanIerleukin1β,IL-1βELISA試劑盒人白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38（16-38），人，雞，小鼠，綿羊，豬，大鼠質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRPACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)  大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白(DAT)試劑盒 Rat dopamine anspoer,DAT ELISA Kit  humanMusmusculussimilao60SribosomalproteinL12,LOC382344ELISAKit人類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽相關(guān)肽（1-29），大鼠質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRPACAP-Related Peptide (1-29)(rat)  CLIAKitfoUBB(HumanBeta-tubulin)ELISAkit人β-微管蛋白規(guī)格：48T/96T  大鼠糖原1酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒 ，英文名： GP-II ELISA Kit

胰多肽，人質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRPancreatic Polypeptide,human  牛奶維生素A高效液相色譜法定量檢測試劑盒20  人細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA檢測試劑盒HumanCyclin-D3ELISAKit 96T/48T

羅紅霉素(標準品)Roxithromycin質(zhì)量規(guī)格：效價測定  英文名稱Humanα-L-fucosidaseausefulELISAKit人α-L-巖藻糖苷酶(AFU)規(guī)格：96T/48T  人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

氟他胺-d7Flutamide-d7質(zhì)量規(guī)格：美國進口  動物組織β-半乳糖苷酶活性比色法定量檢測試劑盒20  小鼠骨特性堿性1酸酶(BALP)試劑盒 Mouse Bone-specific alkaline phosphatase,BALP ELISA kit

4-過氧氫環(huán)1酰胺-d44-Hydroperoxy Cyclophosphamide-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進口  Ricinuscommunisagglinin,RCAELISA試劑盒蓖麻凝集素(RCA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒 ，英文名： OxLDL ELISA Kit

甲氧芐啶乳酸鹽Trimethoprim lactate salt質(zhì)量規(guī)格：美國進口  小鼠趨化因子C-C-基元受體7(CCR7)ELISA試劑盒 ，英文名： CCR7 ELISA Kit  MouseBonemorphogeneticproteieceptor1A,BMPR-1AELISA試劑盒小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T