中文名稱(chēng):安氏毛圓線(xiàn)蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 | 品牌: 一研 |
產(chǎn)地: 國(guó)產(chǎn) | 保存條件: -20℃ |
產(chǎn)品類(lèi)別: PCR試劑盒 PCR檢測(cè)試劑盒 | |
型號(hào): EY00P1196 |
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):安氏毛圓線(xiàn)蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào) : EY00P1196
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)?/span> 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡(jiǎn)短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標(biāo)記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測(cè)樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標(biāo)記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備
根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注:陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)及待測(cè)樣本數(shù)量,計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù),一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)= (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無(wú)模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注:待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進(jìn)行加樣:
表 3.各反應(yīng)孔加樣示例
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn) | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測(cè)樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測(cè)樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線(xiàn)殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
hMNC-CB 類(lèi)臍帶血單核細(xì)胞團(tuán)塊單一捐獻(xiàn)者,超 > 1 mio.cells 心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHCMEC NANBD-H (=4-肼基-7-硝基-2,1,3-苯并惡二唑肼)(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)NBD-H (=4-Hydrazino-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole Hydrazine)
CM-M058小鼠膀胱上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL1,3-環(huán)己二酮(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)1,3-Cyclohexanedione
BCCIP Others Human BRCA2 / BCCIP 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 環(huán)胞甙鹽酸鹽;鹽酸環(huán)胞苷;安西他濱鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCyclocytidine
星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基AM-prf5'-三1酸胞苷三鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí)Cytidine-5'-triphosphate (CTP), 3
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S1 卵巢癌細(xì)胞,H08910細(xì)胞 K-562(慢性髓原白血病細(xì)胞)細(xì)胞弛素A(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCytochalasin A
安氏毛圓線(xiàn)蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒橙皮素(標(biāo)準(zhǔn)品)Hesperitin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousemonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAkit 96T/48T ELISAKitIGF-2兔子胰島素樣生長(zhǎng)因子2規(guī)格:48T/96T
蟲(chóng)草素(標(biāo)準(zhǔn)品)Cordycepin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)試劑盒 Human dipeptidyl peptldase Ⅳ,DPPⅣ ELISA Kit BovineacetoneELISAKit牛同檢測(cè)(acetone)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
川陳皮素;蜜橘黃素Nobiletin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR Ratmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
橙黃ⅠOrangeⅠ質(zhì)量規(guī)格:IND DH10B電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌5X100微升 小鼠氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)試劑盒 Mouse Alanine Aminoansferase,ALT/GPT ELISA Kit
魯米諾鈉(>98%,BS)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BSLuminol, salt 大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA檢測(cè)試劑盒RatBH3ieractingdomaindeathagonist,BidELISAKit 96T/48T HumanChlamydiapneumoniaeaibody,Cpn-AbELISA試劑盒人肺炎衣原體抗體(Cpn-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
溴-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMagenta-Gal 人白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)試劑盒 Human IL-1sRⅡ ELISA kit HumanElastin,ELNELISAKit人彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
紅菲繞啉(升華提)(>99.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC)(T)Bathophenanthroline (purified by sublimation) 英文名稱(chēng)MouseAdiponectinELISAKit小鼠脂聯(lián)素(ADT)規(guī)格:96T/48T 牛鋅金屬硫蛋白(Zn-MT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
浴銅靈(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)Bathocuproine PGL3BASIC+目的基因報(bào)告基因 人組織蛋白酶S(CTSS)試劑盒 Human Cathepsin S,CTSS ELISA Kit
成立日期 | 2014-06-05 (11年) | 注冊(cè)資本 | 100 |
員工人數(shù) | 50-100人 | 年?duì)I業(yè)額 | ¥ 100萬(wàn)以?xún)?nèi) |
主營(yíng)行業(yè) | 生化試劑,抗體,細(xì)胞培養(yǎng),分子生物學(xué),免疫安全 | 經(jīng)營(yíng)模式 | 工廠(chǎng),試劑 |
產(chǎn)品名稱(chēng) | 價(jià)格 | 公司名稱(chēng) | 報(bào)價(jià)日期 | |
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¥1490 |
VIP6年
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上海康朗生物科技有限公司
|
2025-01-08 | |
¥2990 |
VIP1年
|
上海晶風(fēng)生物科技有限公司
|
2025-01-08 | |
¥3490 |
VIP6年
|
上海澤葉生物科技有限公司
|
2025-01-08 |