參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：火雞腸炎科研性PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P1219
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實驗設置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應孔數(shù)，一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進行加樣：
                                  表 3.各反應孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
 HCPEpiC細胞，脈絡叢上皮細胞 小鼠瘤細胞,Nb2-11細胞 前脂肪細胞-皮下cDNAHPA-s cDNA參皂苷Ro（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Ginsenoside Ro

PLC/PRF/5(肝癌亞力山大細胞) 5×106cells/瓶×2肉豆蔻木脂素(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Myrislignan

DLD-1(結腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0222SV-HUC-1(膀胱上皮永生化細胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2肉桂醇（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Cinnamyl alcohol

雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12肉桂醛(標準品)質(zhì)量規(guī)格：GC≥99%，標準品Cinnamaldehyde

MCAM Others Mouse 小鼠 CD146 / MCAM 細胞裂解液 (陽性對照) 參皂苷Rg5質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，對照品GinsenosideRg5

火雞腸炎科研性PCR檢測試劑盒草酸鈉容量分析用溶液標準物質(zhì)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,99.96% oxalate solution for volumetric analysis  大鼠高敏三甲狀腺原氨酸(u-T3)ELISA檢測試劑盒RatUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3ELISAKit 96T/48T  HumanCiliaryNeuroophicFactor,CFELISA試劑盒人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

百里香酚藍(IND)質(zhì)量規(guī)格：INDThymolblue  人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)試劑盒 Human IL-1sRⅠ ELISA kit  Humaneosinophilchemotacticfactor，ECFELISAKit人鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

百里香酚藍(ACS reagent,95 %)質(zhì)量規(guī)格：ACS reagent,95 %Thymolblue  英文名稱MouseadiponectinELISAKit小鼠脂聯(lián)素(adiponectin)ELISAKit規(guī)格：96T/48T  牛乳鐵蛋白(LT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

羅氟司特(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99.0%,標準品Roflumilast  PH0-2顯色(BRILLIAGREEN)指示溶液50毫升  人組蛋白H2b(histon-H2b)試劑盒 Human histon-H2b ELISA Kit

硫酸腺嘌呤二水化合物Adenine Hemisulfate Dihydrate質(zhì)量規(guī)格：美國進口  Mouseansforminggrowthfactorβ2,TGFβ2ELISA試劑盒小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  天門冬酰-NA合成酶(DARS)ELISA試劑盒 ，英文名： DARS ELISA Kit

9-(2-羥乙基)腺嘌呤9-(2-Hydroxyethyl)adenine質(zhì)量規(guī)格：美國進口  小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： TPO-Ab ELISA Kit  MouseSerumamyloidA,SAAELISA試劑盒小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

E-64d,蛋白酶抑制劑,阿洛司他丁E64d,E-64d質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  大鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA檢測試劑盒RatMyosinELISAKit 96T/48T  ChickenIerleukin9,IL-9ELISA試劑盒雞白介素9(IL-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2’-脫氧胞苷-5‘-1酸二鈉鹽dCMP,2Na質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR  人單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)試劑盒 Human MCP-1 ELISA kit  HumanAcrineOrange,AOELISAKit人橙(AO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T