參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：痘苗病毒PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P1225
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無模板對照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個(gè)待測樣本檢測時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
 HAN 羊膜細(xì)胞?；蛆Z去氧膽酸鈉質(zhì)量規(guī)格：≥97.0%,BR taurochenodeoxycholate

CM-R107大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL甘氨脫氧膽酸(GDCA)質(zhì)量規(guī)格：>97%,一水物glycodeoxycholic

Raji，Butt's瘤細(xì)胞衣霉素 質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分Tunicamycin

EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0919 成骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL甲溴東莨菪堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Scopolamine methyl bromide

小鼠畸胎瘤細(xì)胞;F9甘氨鵝脫氧膽酸質(zhì)量規(guī)格：>97%glyhenodeoxycholic  (GCDCA）

痘苗病毒PCR檢測試劑盒草毒死（標(biāo)準(zhǔn)品） Allidochlor質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品  人上皮膜抗原(EMA)ELISA檢測試劑盒HumanEpithelialmembraneaigen,EMAELISAKit 96T/48T  ELISAKitC4兔子補(bǔ)體蛋白4規(guī)格：48T/96T

Amberlite? IRP-69陽離子交換樹脂 Amberlite? IRP-69質(zhì)量規(guī)格：  大鼠胰蛋白酶原-1 試劑盒 Rat ypsinogen 1 ELISA Kit  ChickenVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit雞血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氨苯砜(標(biāo)準(zhǔn)品)4,4'-Diaminodiphenylsulfone質(zhì)量規(guī)格：含量測定  英文名稱抗胰島素自體抗體規(guī)格：96T/48T  人鈣離子通道抗體(VGCC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

茶苯海明（標(biāo)準(zhǔn)品）Dimenhydrinate質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定  父母印記(IMPRIING)基因克隆技術(shù)試劑盒5  小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒 mouse Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit

硫酸鈦(>96%,BR)Titanium (IV) sulfate質(zhì)量規(guī)格：>96%,BR  RatmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/AgBⅡ/H-1ⅡELISAKit大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人骨粘連蛋白(ON)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

檸檬酸三丁酯(>98%,BR)Tributyl 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  DH5α細(xì)菌1毫升  小鼠半乳糖凝集素-3(Gal-3)試劑盒 Mouse Galectin 3,GAL-3 ELISA Kit

草酸銅(>97%,Tech Grade)Copper(II) oxalate hydrate質(zhì)量規(guī)格：>97%,工業(yè)級  Mouseoxytocin,OTELISA試劑盒小鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  胸腺表達(dá)趨化因子(TECK/CCL25)ELISA試劑盒 ，英文名： TECK/CCL25 ELISA Kit

無水硫酸銅(>99%,BR)Copper(II) sulfate, anhydrous質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR  小鼠內(nèi)皮細(xì)胞TEK酪酸激酶(Tie2)ELISA試劑盒 ，英文名： Tie2 ELISA Kit  MouseHeatShockProtein70,Hsp-70ELISA試劑盒小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T