參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:瓦螨通用PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào) : EY00P1231
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡(jiǎn)短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標(biāo)記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測(cè)樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標(biāo)記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備
根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注:陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量,計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù),一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)= (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無(wú)模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注:待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進(jìn)行加樣:
表 3.各反應(yīng)孔加樣示例
標(biāo)準(zhǔn)曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測(cè)樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測(cè)樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 溴甲后馬托品質(zhì)量規(guī)格:BR,進(jìn)口原裝Homatropine Methyl Bromide
小鼠海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞MA-h乙酸阿比特龍酯質(zhì)量規(guī)格:>98%,細(xì)胞色素CYP17抑制劑Abiraterone Acetate
猴腎細(xì)胞;Vero IgCD4 巨核細(xì)胞白血病,CHRF細(xì)胞 SK-N-MC(神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞)卡那替尼質(zhì)量規(guī)格:含量> 99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Canertinib 2HCl
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0928卡培他濱質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Capecitabine
GFRA2 Others Mouse 小鼠 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 卡培他濱(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Capecitabine
瓦螨通用PCR檢測(cè)試劑盒燦爛綠,亮綠Brilliant green質(zhì)量規(guī)格:BS 大米淀粉生物萃取試劑盒20 山羊痘(GPV)核酸檢測(cè)試劑盒 48T
頭孢呋辛酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Cefuroxime axetil質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定 Ratleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISA試劑盒大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Humanprimaryhepaticcarcinoma,PHCELISA試劑盒人肝癌抗原(PHC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
青霉素G鉀鹽Penicillin G, potassium salt 質(zhì)量規(guī)格:>1500U/mg,USP,BR 小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒 ,英文名: PF-3 ELISA Kit ELISAKitTF小鼠組織因子規(guī)格:48T/96T
青霉素G鉀(標(biāo)準(zhǔn)品)Penicillin G, potassium salt 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定 小鼠C型尿肽(CNP)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseC-typenaiureticpeptide,CNPELISAKit 96T/48T HumanC-ReactiveProtein,CRPELISAKit人C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
硫酸鈰八水(>97%,BR)Cerium(III) sulfate, octahydrate質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 人α半乳糖苷酶(αGAL)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanα-galactosidase,αGALELISAKit 96T/48T deoxypyridinoline,DPDELISA試劑盒兔子脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Bz-2'-脫氧胞苷亞1酰胺單體Bz-dC Phosphoramidite質(zhì)量規(guī)格:>98% 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)試劑盒 Rat Vascular endothelial cell growth factor receptor 1,VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin3,AFP-L3ELISAKit人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
匹多莫德Pidotimod質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 英文名稱RatFREEPSAELISAKit大鼠游離前列腺特異性抗原(FREEPSA)規(guī)格:96T/48T 人叉頭框蛋白04(FoxO4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
匹多莫德(標(biāo)準(zhǔn)品)Pidotimod質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 型酸性1酸酶(TACP)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20 豚鼠抗利尿激素/血管加壓素/精氨酸加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒 Guinea pig aidiuretic hormone ELISA Kit
關(guān)鍵字: 瓦螨核酸檢測(cè)試劑盒;瓦螨PCR試劑盒;瓦螨PCR擴(kuò)增試劑盒;瓦螨PCR熒光探針試劑盒;瓦螨通用型PCR試劑盒;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè),公司自成立以來(lái),秉承""全心全意服務(wù)于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領(lǐng)域,運(yùn)用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機(jī)構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務(wù)生物科技領(lǐng)域的科學(xué)研究人員。
公司具有對(duì)普通貨物、冷藏及冷凍倉(cāng)庫(kù)的存儲(chǔ)、包裝及運(yùn)輸能力。
公司將始終堅(jiān)持信譽(yù)立業(yè)、以人為本、質(zhì)量保證、誠(chéng)信服務(wù)的宗旨,不斷拼搏,開(kāi)拓進(jìn)取,與各界朋友攜手共創(chuàng)美好未來(lái)。