中文名稱:皮欽德病毒PCR檢測(cè)試劑盒 | 品牌: 一研 |
產(chǎn)地: 國(guó)產(chǎn) | 保存條件: -20℃ |
產(chǎn)品類別: PCR試劑盒 PCR檢測(cè)試劑盒 | |
型號(hào): EY00P897 |
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 型號(hào) |
皮欽德病毒PCR檢測(cè)試劑盒 | 50T | EY00P897 |
組成及試劑配制
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?/span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
CM-H036小腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL氫氯噻嗪質(zhì)量規(guī)格:度>99%,ARHydrochlorothiazide
HA Others H12N1 甲型流感 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氫氯噻嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Hydrochlorothiazide
小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL醋酸高(>95%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BCLead (IV) acetate
ATDC-5-EGFP[ATDC-5-pGC-FU-GFP](穩(wěn)定株)小鼠軟骨細(xì)胞 ATDC-5-EGFP[ATDC-5-pGC-FU-GFP] (stable sain) mice cartilage cells DMEM/F12(1:1)+10% FBS粉(>99%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BCLead powder
IL7 Protein Rat 重組大鼠 IL7 / ierleukin 7 蛋白堿式碳酸(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRLead(II) carbonate basic
奧卡西平(標(biāo)準(zhǔn)品)Oxcarbazepine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Rat immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit 大鼠球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 ELISAKitT兔子睪同規(guī)格:48T/96T
金絲桃素(標(biāo)準(zhǔn)品)Hypericin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 humanNoradrenaline,NAELISAKit 人去甲(NA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 ChickenNuclearfactor-kappaB,NF-κBELISAKit雞核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D-葡萄糖-6-1酸D-(+)-Glucopyranose 6-phosphate質(zhì)量規(guī)格:1M in H2O(260Mg/ml),進(jìn)口原裝 HumanAi-phosphatidylserineaibody,APSAELISA試劑盒人抗1脂酰絲氨酸抗體(APSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人甘露糖凝集素受體(MBLR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
6-1酸葡萄糖三鈉鹽D-Gluconate 6-phosphate 3 salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 植物細(xì)胞可溶性總核蛋白粗提制備試劑盒20 小鼠阿立新A(Orexin A)試劑盒 Mouse Orexin A ELISA Kit
皮欽德病毒PCR檢測(cè)試劑盒拉米夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)Lamivudine質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 [35S]-Met細(xì)胞代謝標(biāo)記試劑盒20 豬托克特諾病毒(TTV)核酸檢測(cè)試劑盒(-PCR法) 48T
酸性品紅 Fuchsin質(zhì)量規(guī)格:BS MouseAquaporin3,AQP-3ELISA試劑盒小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Humanplateletbasicprotein,PBPELISA試劑盒人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
茜素絡(luò)合指示劑(IND)Alizarin complexone質(zhì)量規(guī)格:IND 小鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 ELISAKitVB12植物維生素B12規(guī)格:48T/96T
茜素絡(luò)合指示劑(高級(jí),98%)Alizarin complexone質(zhì)量規(guī)格:高級(jí),98% Rat protein kinase B (PKB) ELISA Kit 大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒 HumanCyclin-dependekinase1,CDK-1ELISAKit人周期素依賴性激酶1(CDK-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
使用方法:
一、樣品DNA的制備用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為6,5,4,3,2和1號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL純水(*用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用TE緩沖液或純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號(hào)管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從6號(hào)管中取5 μL溶液到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。6. 換槍頭,從5號(hào)管中取5 μL溶液到4號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從1-6號(hào)管中分別取5 μL和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
成立日期 | 2014-06-05 (11年) | 注冊(cè)資本 | 100 |
員工人數(shù) | 50-100人 | 年?duì)I業(yè)額 | ¥ 100萬(wàn)以內(nèi) |
主營(yíng)行業(yè) | 生化試劑,抗體,細(xì)胞培養(yǎng),分子生物學(xué),免疫安全 | 經(jīng)營(yíng)模式 | 工廠,試劑 |
產(chǎn)品名稱 | 價(jià)格 | 公司名稱 | 報(bào)價(jià)日期 | |
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¥2990 |
VIP1年
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上海晶風(fēng)生物科技有限公司
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2024-11-07 | |
¥3990 |
VIP5年
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上海澤葉生物科技有限公司
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2024-11-07 | |
¥1490 |
VIP5年
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上??道噬锟萍加邢薰?/div>
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2024-11-07 |