參數規(guī)格:
產品名稱:豬內源性逆轉錄病毒前病毒PCR檢測試劑盒
型號 : EY00P923
產品規(guī)格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質控 ERC 的制備
根據待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質控 NEG 的制備
根據實驗設置陰性質控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質控 NEG。 注:陰性質控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1,根據所要檢測的標準曲線及待測樣本數量,計算所需反應孔數,一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據反應孔數計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應孔數+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應孔數+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應孔數+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進行加樣:
表 3.各反應孔加樣示例
標準曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
CL-0293MuM-2B(眼脈絡色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2BOC-D-shēng huà shì jì容量:1公斤
293A,胚腎上皮細胞系(腺病毒包裝級別) 小鼠胚胎成纖維細胞(前脂肪),3T3L1細胞 Hs 683(腦視神經膠質瘤細胞)亞肖基紅鹽 1-nitnOSO-2-NcPHTHOL-3,6-DISULFONIC cCID DIwo7ium ScLT 1922/2/3
侵襲性脈絡膜色素瘤細胞;MuM-2B副溶血性弧菌增菌液shēng huà shì jì容量:5克
CADM1 Others Human CADM1 / IGSF4A 細胞裂解液 (陽性對照) 35mm玻底培養(yǎng)皿shēng huà shì jì容量:保存:-20℃1KU
293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP溴;3-溴-1-; 炔丙基溴Propargyl broMide;
豬內源性逆轉錄病毒前病毒PCR檢測試劑盒安息香甲基(>98.0%(GC))Benzoin Methyl Ether質量規(guī)格:>98.0%(GC) 大鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA檢測試劑盒RatOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAkit 96T/48T ELISAKitLIFR兔子白血病抑制因子受體規(guī)格:48T/96T
安息香異丁基(>95.0%(GC))Benzoin Isobutyl Ether質量規(guī)格:>95.0%(GC) 人丁型肝炎病毒(HDV)抗原試劑盒 Human hepatitis D virus(HDV) aigen ELISA Kit Chickenviruseeritis,DEVELISAKit雞病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2,2-二乙氧基苯乙酮(>95.0%(GC))2,2-Diethoxyacetophenone質量規(guī)格:>95.0%(GC) Ratmyelinbasicprotein,MBPELISAKit大鼠髓1脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人富組蛋白(histatin 5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2,2-二甲氧基-2-乙酮(>98.0%(GC))2,2-Dimethoxy-2-phenylacetophenone質量規(guī)格:>98.0%(GC) DNA銀染試劑盒5 小鼠β-防御素1 試劑盒 Mouse β-Defensins 1 ELISA Kit
克林霉素質量規(guī)格:美國進口Clindamycin HumanIerleukin-2receptor,IL-2RELISA試劑盒人白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠缺氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒 ,英文名: HIF-1α ELISA Kit
4-羥基氨苯蝶啶質量規(guī)格:美國進口4-Hydroxy Triamterene 組織1酸二酯酶2(PDE2)活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量檢測試劑盒10 人表皮細胞活化肽因子(CAPF)ELISA檢測試劑盒HumanCicularActivePeptideFactor,CAPFELISAKit 96T/48T
4-羥基氨苯蝶啶硫酸鈉鹽質量規(guī)格:美國進口4-Hydroxy Triamterene Sulfate, Salt HumanIerleukin18,IL-18ELISAKit人白介素18(IL-18)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 植物1,5-二1酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisCO)試劑盒 Pla Ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase(RuBisCO)ELISA Kit
2,4-二氨基-6-苯基-7-蝶啶質量規(guī)格:美國進口2,4-Diamino-6-phenyl-7-pteridinol 人乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 CLIAKitforPIAb-IgG/IgM)ELISAKit大鼠1脂酰肌醇抗體IgG/IgM規(guī)格:48T/96T
關鍵字: 豬內源性逆轉錄病毒前病毒核酸檢測試劑盒;豬內源性逆轉錄病毒前病毒PCR試劑盒;豬內源性逆轉錄病毒前病毒PCR擴增試劑盒;豬內源性逆轉錄病毒前病毒PCR熒光探針試;豬內源性逆轉錄病毒前病毒通用型PCR試劑;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領域,運用生物技術和科研試劑,發(fā)展現代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機構、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質的產品,服務生物科技領域的科學研究人員。
公司具有對普通貨物、冷藏及冷凍倉庫的存儲、包裝及運輸能力。
公司將始終堅持信譽立業(yè)、以人為本、質量保證、誠信服務的宗旨,不斷拼搏,開拓進取,與各界朋友攜手共創(chuàng)美好未來。