服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 型號(hào) |
高純度質(zhì)粒DNA大量提取試劑盒(硅膠沉淀法) | 10次 | EY01P1020 |
組成及試劑配制
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
胰蛋白酶1:250Trypsin 1:250 fromPorcine pancreas質(zhì)量規(guī)格:>250U/mg,BR 人抗α干擾素抗體(IFNα-Ab)試劑盒 Human IerferonαAibody,IFNα-Ab ELISA Kit 人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
吲哚美辛Indometacin質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR,BP2010 Rabbiturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAKit兔尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 豬末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)試劑盒 Pig terminal compleme complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit
吲哚美辛(標(biāo)準(zhǔn)品)Indometacin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 載玻片細(xì)胞GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 Humanmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISAKit 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
西米替汀Cimetidine質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,A型 Humanβ-lactamaseELISA試劑盒人β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Humanmembraneattackcomplex,MACELISA試劑盒人膜攻擊復(fù)合物(MAC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸奧昔布寧(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Oxybutynin HCl RatVitaminD,VDELISA試劑盒大鼠維生素D(VD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 前膠原C端肽酶()ELISA試劑盒 ,英文名: ELISA Kit
鹽酸帕羅西汀質(zhì)量規(guī)格:>98%,半水合物Paroxetine HCl 小鼠固酮(ALD)ELISA試劑盒 ,英文名: ALD ELISA Kit rabbitiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1/CD54ELISA試劑盒兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸帕羅西汀(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Paroxetine HCl 小鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit 96T/48T Humanai-ribonucleoproteinAibody,RNP-AbELISA試劑盒人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
吡羅昔康質(zhì)量規(guī)格:>97%,USP gradePiroxicam 人鈣結(jié)合蛋白(CR)試劑盒 Human Calretinin,CR ELISA Kit HumanCholic,CAELISAKit人膽酸(CA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
高純度質(zhì)粒DNA大量提取試劑盒(硅膠沉淀法)小鼠組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)ELISA試劑盒 ,英文名: TIMP2 ELISA Kit 36052-37-6山姜素規(guī)格 Alpinetin
鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA檢測(cè)試劑盒Duckmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISAKit 96T/48T 19309-14-9小豆蔻明廠(chǎng)家 Cardamonin
犬胰腺甘油三酯脂酶(PNLIP)試劑盒 Dog Pancreatic iacylglycerol lipase,PNLIP ELISA kit 24502-78-1乙酰紫草素說(shuō)明書(shū) Acetylshikonin
英文名稱(chēng)MouseAβ1-40proteinELISAKit小鼠Aβ1-40蛋白規(guī)格:96T/48T 34157-83-0雷公藤紅素品牌 Celastrol
同酸待測(cè)樣品處理試劑盒20 69659-80-9丹參酮IIA-磺酸鈉規(guī)格 Sulfotanshinone Injection
使用方法:
一、樣品DNA的制備用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)(以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為6,5,4,3,2和1號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL純水(*用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用TE緩沖液或純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號(hào)管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從6號(hào)管中取5 μL溶液到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。6. 換槍頭,從5號(hào)管中取5 μL溶液到4號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從1-6號(hào)管中分別取5 μL和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
關(guān)鍵字: 高純度質(zhì)粒DNA大量(硅膠沉淀法)核酸檢;高純度質(zhì)粒DNA大量(硅膠沉淀法)PCR;高純度質(zhì)粒DNA大量(硅膠沉淀法)PCR;高純度質(zhì)粒DNA大量(硅膠沉淀法)PCR;高純度質(zhì)粒DNA大量(硅膠沉淀法)通用型;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷(xiāo)售企業(yè),公司自成立以來(lái),秉承""全心全意服務(wù)于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領(lǐng)域,運(yùn)用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類(lèi)大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機(jī)構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務(wù)生物科技領(lǐng)域的科學(xué)研究人員。
公司具有對(duì)普通貨物、冷藏及冷凍倉(cāng)庫(kù)的存儲(chǔ)、包裝及運(yùn)輸能力。
公司將始終堅(jiān)持信譽(yù)立業(yè)、以人為本、質(zhì)量保證、誠(chéng)信服務(wù)的宗旨,不斷拼搏,開(kāi)拓進(jìn)取,與各界朋友攜手共創(chuàng)美好未來(lái)。