應(yīng)用
用于堿性磷酸酶標記分子的比色檢測,可使用5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯(BCIP)和硝基藍四唑(NBT)。BCIP/NBT底物系統(tǒng)具有多種功能并用于多種應(yīng)用,包括Northern Southern和Western blotting、原位雜交和免疫組化。BCIP以兩種鹽形式提供:可溶于水的二鈉鹽和可溶于二甲基甲酰胺的對甲苯胺形式。這些鹽形式可用于制備與NBT及反應(yīng)緩沖液組合的儲存溶液,并形成堿性磷酸酶的底物溶液。當與堿性磷酸酶一起孵育時,該底物系統(tǒng)可產(chǎn)生不溶的NBT二甲嗪產(chǎn)物,具有容易被觀察到的紫色。為了方便起見,BCIP和NBT的混合物是以一種易溶解的片劑形式或作為即用型液體而提供的。
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