1.細胞起源:
細胞簡稱 NCI-H596
細胞別稱 H596; H-596; NCI-HUT-596; NCIH596
細胞背景描述 NCI-H596細胞是1983年由Gazdar·A·F和Oie·H從一名患有肺腺鱗癌的73歲白人男性患者的胸壁腫物中分離得到;腫塊的獲取先于治療。NCI-H596細胞表達與正常肺組織水平相當的p53,沒有大的結構DNA的異常。NCI-H596細胞角蛋白和波形蛋白陽性,神經絲三聯(lián)蛋白陰性;NCI-H596細胞表達多種鱗狀細胞分化標志,如谷氨酰胺轉移酶活性、被膜素的產生和交聯(lián)包膜的形成。
供體年齡 男;73歲
組織來源 肺
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 肺癌細胞
生長特性 貼壁細胞
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 RPMI-1640(PM150110)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟 1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫壁并在液體里反復吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液;
6、收集細胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
本產品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實際收貨產品說明書為準,網站說明書僅供參考。