1.細胞起源:
細胞簡稱 NCI-H446 [H446]
細胞別稱 H446; H-446; NCI-446; NCIH446
細胞背景描述 NCI-H446細胞是從一位小細胞肺癌患者的胸水中建立的,NCI-H446細胞的原始形態(tài)并不具有小細胞肺癌特征。NCI-H446細胞是小細胞肺癌的生化和形態(tài)學上的變種,表達神經(jīng)元特有的烯醇酶和腦部肌酸激酶同功酶。NCI-H446細胞內(nèi)左旋多巴脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產(chǎn)素或胃泌激素釋放肽未達到可檢測水平。C-myc DNA序列擴增約20倍,c-myc RNA比正常細胞增加15倍。最初,傳代培養(yǎng)基用RPMI-1640(含5%胎牛血清、10nM氫化可的松、0.005mg/ml胰島素、0.01mg/ml鐵傳遞蛋白、10nM 17-β雌二醇、30nM亞硒酸鈉)。
供體年齡 男;61歲
組織來源 肺;轉(zhuǎn)移灶:肋膜滲出癌;小細胞肺癌
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 肺癌細胞
生長特性 半貼半懸
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 RPMI-1640(PM150110)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、該細胞為半貼壁半懸浮細胞,懸浮細胞是活細胞,可用離心管收集細胞懸液后,于1200 rpm(250g左右)離心收集細胞;
2、部分貼壁不牢的細胞可直接吹起使之懸浮;
3、貼壁較牢固的細胞可用PBS潤洗后,在培養(yǎng)瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液(含EDTA)置于37℃培養(yǎng)箱中消化,待細胞變圓收縮后可用4~6 mL左右完全培養(yǎng)基進行終止消化,輕輕吹散細胞后離心搜集細胞;
4、將懸浮的細胞和貼壁的細胞收集到一起混勻后按比例接種到新的培養(yǎng)瓶。
消化時間 1~2分鐘
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實際收貨產(chǎn)品說明書為準,網(wǎng)站說明書僅供參考。