1.細(xì)胞起源：
細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng) NCI-H2227
細(xì)胞別稱(chēng) H2227; H-2227
細(xì)胞背景描述 NCI-H2227細(xì)胞是于1989年8月從一名54歲白人男性小細(xì)胞肺癌皮膚轉(zhuǎn)移灶中分離得到的。
供體年齡 男；54歲
組織來(lái)源 肺
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類(lèi)型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類(lèi)型 肺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 半貼半懸
生物安全等級(jí) 1
2.培養(yǎng)及保藏：
完全培養(yǎng)基 DMEM/F12(PM150312)＋5μg/ml Insulin＋0.01mg/ml
Transferrin＋30nM Sodium Selenite＋10nM Hydrocortisone＋10nM βestradiol＋2mM L-glutamine(PB180420)＋5% FBS(164210-50)＋1%
P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣，95%；CO 2，5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法：
傳代步驟
1、該細(xì)胞為半貼壁半懸浮細(xì)胞，懸浮細(xì)胞是活細(xì)胞，可用離心管收集細(xì)胞懸液后，于1200 rpm（250g左右）離心收集細(xì)胞；
2、部分貼壁不牢的細(xì)胞可直接吹起使之懸??；
3、貼壁較牢固的細(xì)胞可用PBS潤(rùn)洗后，在培養(yǎng)瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液（含EDTA）置于37℃培養(yǎng)箱中消化，待細(xì)胞變圓收縮后可用4~6 mL左右完全培養(yǎng)基進(jìn)行終止消化，輕輕吹散細(xì)胞后離心搜集細(xì)胞；
4、將懸浮的細(xì)胞和貼壁的細(xì)胞收集到一起混勻后按比例接種到新的培養(yǎng)瓶。
傳代比例（密度） 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
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