1.售前須知:
1、該細(xì)胞培養(yǎng)難度較高,溫度波動(dòng)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞空泡增多; 2、該細(xì)胞為38℃~40℃培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為39℃,37℃培養(yǎng)會(huì)影響細(xì)胞狀態(tài),建議提前準(zhǔn)備專用培養(yǎng)箱; 3、受溫度波動(dòng)影響,收貨常見細(xì)胞空泡較多,穩(wěn)定培養(yǎng)后可恢復(fù)。
2.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 UMNSAH/DF-1
細(xì)胞別稱 UMNSAH-DF-1; UMNSAH-DF 1; UMNSAH-DF1; UMNSAH/DF#1;DF-1; DF1; Douglas Foster-1
細(xì)胞背景描述 UMNSAH/DF-1細(xì)胞是起源于10日齡的ELL-0雞蛋的雞細(xì)胞株,自發(fā)永生化。分離原代雞胚成纖維細(xì)胞并在培養(yǎng)液中培養(yǎng),傳代直到衰老;在衰老過程中離心以保持細(xì)胞培養(yǎng)在30%到60%滿;不衰老的克隆進(jìn)行鑒定并傳代不少于30次。在軟瓊脂上沒有觀察到克隆增殖,說明UMNSAH/DF-1細(xì)胞是永生化而沒有轉(zhuǎn)化。UMNSAH/DF-1細(xì)胞可作為病毒增殖、重組蛋白表達(dá)和重組病毒生產(chǎn)的基質(zhì)。
供體年齡 10日齡
組織來源 胚胎,自發(fā)永生化
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 自發(fā)永生化細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
生物安全等級(jí) 1
3.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 DMEM(PM150210)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
39℃(Max.40℃,Min.38℃)
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
4.傳代方法:
傳代步驟 1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液;
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 1~2分鐘
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~22-36 hours
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動(dòng)物治療等其它臨床診斷使用!以實(shí)際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。