1.細胞起源:
細胞簡稱 WISH
細胞別稱 Wistar Institute, Susan Hayflick
細胞背景描述 最初以為,WISH細胞的起源是正常羊膜,但隨后通過同工酶分析、HeLA標記染色體和DNA指紋法分析,WISH細胞的起源是HeLa細胞污染的。WISH細胞角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。注意:WISH細胞包含HeLa標記染色體,是從HeLa污染細胞中建株的。
供體年齡 女
組織來源 起源HeLa細胞污染
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 宮頸癌細胞
生長特性 貼壁細胞
生物安全等級 2
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 MEM(含NEAA)(PM150410)+1mM Sodium Pyruvate+10%FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟 1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫壁并在液體里反復吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液;
6、收集細胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
傳代比例(密度) 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
本產品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實際收貨產品說明書為準,網站說明書僅供參考。