1.細胞起源:
細胞簡稱 WISH
細胞別稱 Wistar Institute, Susan Hayflick
細胞背景描述 最初以為,WISH細胞的起源是正常羊膜,但隨后通過同工酶分析、HeLA標記染色體和DNA指紋法分析,WISH細胞的起源是HeLa細胞污染的。WISH細胞角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。注意:WISH細胞包含HeLa標記染色體,是從HeLa污染細胞中建株的。
供體年齡 女
組織來源 起源HeLa細胞污染
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 宮頸癌細胞
生長特性 貼壁細胞
生物安全等級 2
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 MEM(含NEAA)(PM150410)+1mM Sodium Pyruvate+10%FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟 1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液;
6、收集細胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
傳代比例(密度) 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實際收貨產(chǎn)品說明書為準,網(wǎng)站說明書僅供參考。