TF-1(人血液白血病細胞)
1.細胞起源:
細胞簡稱 TF-1
細胞別稱 TF1; MFD-1
細胞背景描述 TF-1細胞是由Kitamura·T等人于1987年建立,源于一名35歲日本男性的肝素化骨髓抽取樣本,該患者具有嚴重的全血細胞減少癥。TF1細胞生長完全依賴于IL-3或GM-CSF,對IL-無反應。多種淋巴因子和細胞因子對TF-1細胞都有作用,如:IL-1、IL-4、IL-6、IL-9、IL-11、IL-13、CSF、LIF、NGF。TF-1細胞不表達血型糖蛋白A和碳酸酐酶I。由TF-1細胞的形態(tài)和細胞化學特征及珠蛋白基因的組成性表達,顯示TF-1細胞屬于紅系。
供體年齡 男;35歲
組織來源 骨髓
細胞形態(tài) 淋巴母細胞樣
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 白血病細胞
生長特性 半貼半懸
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 RPMI-1640(PM150110)+2ng/ml rhGM-CSF+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、該細胞為半貼壁半懸浮細胞,懸浮細胞是活細胞,可用離心管收集細胞懸液后,于1200 rpm(250g左右)離心收集細胞;
2、部分貼壁不牢的細胞可直接吹起使之懸??;
3、貼壁較牢固的細胞可用PBS潤洗后,在培養(yǎng)瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液(含EDTA)置于37℃培養(yǎng)箱中消化,待細胞變圓收縮后可用4~6 mL左右完全培養(yǎng)基進行終止消化,輕輕吹散細胞后離心搜集細胞;
4、將懸浮的細胞和貼壁的細胞收集到一起混勻后按比例接種到新的培養(yǎng)瓶。
傳代比例(密度) 4×10^4cells/mL
換液頻次 2~3次/周
倍增時間 ~36-72 hours
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