1.細(xì)胞起源：
細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng) T84
細(xì)胞別稱(chēng) T-84; T 84
細(xì)胞背景描述 T84細(xì)胞是從一位72歲男性結(jié)腸癌患者的肺轉(zhuǎn)移灶建立的可移植人類(lèi)癌細(xì)胞株；腫瘤組織皮下接種于BALB/c裸鼠，并連續(xù)進(jìn)行移植。在裸鼠身上的移植過(guò)程中，細(xì)胞株始終保持結(jié)腸癌的原始組織性狀。在無(wú)胸腺小鼠中傳代23代后建立了T84細(xì)胞。T84細(xì)胞單層生長(zhǎng)到飽和并在接觸細(xì)胞間展現(xiàn)出緊密連接和橋粒，有很多關(guān)于多肽類(lèi)激素和神經(jīng)遞質(zhì)并維持定向電解質(zhì)傳輸?shù)氖荏w。T84細(xì)胞展現(xiàn)了接觸細(xì)胞中的緊密連接和橋粒，角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性。
供體年齡 男
組織來(lái)源 器官：結(jié)腸； 疾病：結(jié)直腸癌；取材轉(zhuǎn)移灶：肺
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類(lèi)型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類(lèi)型 肺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
生物安全等級(jí) 1
2.培養(yǎng)及保藏：
完全培養(yǎng)基 DMEM/F12(PM150312)＋5% FBS(164210-50)＋1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣，95%；CO 2，5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法：
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液；
2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄；
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞；
4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶；
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液；
6、收集細(xì)胞懸液離心，1200rpm/min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄；
7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細(xì)胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補(bǔ)足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 2~3分鐘
傳代比例（密度） 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
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