1.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 ME-180
細(xì)胞別稱 Me-180; ME 180; ME180
細(xì)胞背景描述 ME-180細(xì)胞來(lái)源于一個(gè)細(xì)胞集落不規(guī)則沒(méi)有顯著角質(zhì)化的侵染性鱗狀細(xì)胞癌。單層培養(yǎng)的ME-180細(xì)胞間可以觀察到帶狀連接,也注意到有細(xì)胞質(zhì)張力絲。1970年,發(fā)現(xiàn)支原體污染并去除。TNF-α抑制ME-180細(xì)胞的生長(zhǎng);ME-180細(xì)胞含有人乳頭瘤病毒DNA,與HPV-39的同源性高于HPV-18。
供體年齡 女;66歲
組織來(lái)源 宮頸表皮樣癌網(wǎng)膜轉(zhuǎn)移灶
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 宮頸癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
生物安全等級(jí) 2
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 McCoy's 5A(PM150710)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、該細(xì)胞為半貼壁半懸浮細(xì)胞,懸浮細(xì)胞是活細(xì)胞,可用離心管收集細(xì)胞懸液后,于1200 rpm(250g左右)離心收集細(xì)胞;
2、部分貼壁不牢的細(xì)胞可直接吹起使之懸??;
3、貼壁較牢固的細(xì)胞可用PBS潤(rùn)洗后,在培養(yǎng)瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液(含EDTA)置于37℃培養(yǎng)箱中消化,待細(xì)胞變圓收縮后可用4~6 mL左右完全培養(yǎng)基進(jìn)行終止消化,輕輕吹散細(xì)胞后離心搜集細(xì)胞;
4、將懸浮的細(xì)胞和貼壁的細(xì)胞收集到一起混勻后按比例接種到新的培養(yǎng)瓶。
消化時(shí)間 2~3分鐘
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~36 hours
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