1.細胞起源:
細胞簡稱 LNCaP clone FGC
細胞別稱 LNCaP-Clone-FGC; LNCaP.FGC; LNCaP-FGC; LNCaP FGC; LNCaPATCC
細胞背景描述 人前列腺癌細胞LNCaP clone FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結(jié)針刺活檢中分離,該患者經(jīng)確診為前列腺癌轉(zhuǎn)移。LNCaP clone FGC細胞對5-α-二氫睪酮(生長調(diào)節(jié)子和酸性磷酸脂酶產(chǎn)物)有響應(yīng)。LNCaP clone FGC細胞并不形成一致的單層,而是形成集落,在傳代時可以用滴管反復(fù)吹吸打碎。LNCaP clone FGC細胞僅僅輕輕地吸附在基底上,不形成匯合,很快使培養(yǎng)基變酸。LNCaP clone FGC細胞生長極其緩慢,傳代后48小時內(nèi)不應(yīng)擾動。當(dāng)培養(yǎng)瓶封包后,多數(shù)LNCaP clone FGC細胞從培養(yǎng)瓶底分離,懸浮在培養(yǎng)基中。收到后,在通常培養(yǎng)單層細胞的條件下培養(yǎng)24-48小時,以使細胞再貼壁。此后,可以換上新鮮培養(yǎng)液。如果需要,培養(yǎng)瓶內(nèi)容物可以收集,300g離心15分鐘,以10毫升培養(yǎng)液重懸并培養(yǎng)到一個單獨的培養(yǎng)瓶中。
供體年齡 男;50歲
組織來源 前列腺;左鎖骨淋巴結(jié)癌轉(zhuǎn)移灶
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 前列腺癌細胞
生長特性 貼壁細胞
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 RPMI-1640(PM150110)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液;
6、收集細胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
消化時間 2~3分鐘
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時間 ~32-36 hours
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。