鼻咽上皮細胞 NP69產(chǎn)品基本信息
細胞名稱：：NP69，鼻咽上皮細胞
規(guī)格：1×106cells/T25或1mL凍存管
細胞貨期現(xiàn)貨，1周左右
種屬來源：人
組織來源：鼻
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
生長特性：貼壁生長
培養(yǎng)基：89% DMEM+10% FBS+PS+10ng/ml EGF
生長條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃
傳代方法：1:2至1:3，每周 2-3次
凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存
支原體檢測：無
細胞培養(yǎng)操作
1)復(fù)蘇細胞：將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3
min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤? cm皿中，加入約4
mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%
EDTA)于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-3min(視細胞情況而定)，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000
rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3)細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2.
仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。
3.
用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞，死亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。.觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900
rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6.
建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。
收到細胞后一次傳代建議1：2傳代 。
9. 注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
關(guān)鍵字： NP69人鼻咽上皮細胞;NP69;NP69細胞;
廈門逸漠生物科技有限公司(Xiamen Immocell Biotechnology Co.,Ltd.)坐落于廈門國家留學創(chuàng)業(yè)園(翔安)產(chǎn)業(yè)園，是一家專注于細胞生物學領(lǐng)域新產(chǎn)品、新技術(shù)開發(fā)的高新技術(shù)企業(yè)。公司產(chǎn)品涵蓋：細胞系、原代細胞、標記細胞、耐藥細胞、免疫細胞及胎牛血清、培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無血清冷凍液、支原體/黑膠蟲清除劑、細胞因子等產(chǎn)品，提供細胞形態(tài)和免疫相關(guān)檢測、流式細胞檢測 、細胞學服務(wù)、分子生物學檢測等多種技術(shù)服務(wù)。
逸漠生物(IMMOCELL)擁有一支具有深厚造詣和豐富經(jīng)驗的高端技術(shù)人才，建設(shè)了高規(guī)格的研發(fā)實驗室與生產(chǎn)車間，建立了規(guī)范的研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、客服管理體系。公司與國內(nèi)外多家醫(yī)院、高等院校、科研院所、生物醫(yī)藥公司建立了良好的合作關(guān)系，贏得了良好的市場聲譽和廣泛的客戶認可，努力成為生命科學界可靠的合作伙伴和堅強的技術(shù)后盾。