使用方法(1)hepes緩沖液可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中,再過濾除菌.每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2,濾過除菌后使用.此時HEPES的使用濃度為10mmol/L.(2)亦可配成100x貯存液(lmol/L),使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液,最終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)hepes緩沖液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中,用lNNaOH調(diào)pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過濾除菌,分裝小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存.
HEPES(4-羥乙基哌嗪乙磺酸)是一種非離子兩性緩沖液,具有高度極性,對多種化學(xué)試劑和酶呈惰性,不參加和不干擾生物化學(xué)反應(yīng)的過程,對酶化學(xué)反應(yīng)等無抑制作用,因此可專門用于對細胞器和極易變性的、pH敏感的蛋白質(zhì)和酶的研究工作。用作生化試劑用途生物緩沖劑;分離與分析RNA核組分的反應(yīng)緩沖液、預(yù)雜交緩沖液、雜交緩沖液;用于RNA與T4RNA。分子生物學(xué)級用于用T4RNA連接酶進行RNA3'-末端標記,分離與分析核RNA之反應(yīng)緩沖液組分、預(yù)雜交緩沖液緩和雜交緩沖液成分。細胞-細胞黏附,細胞短期聚集培養(yǎng),清洗組織、細胞所用緩沖液
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